寬場成像是生命科學顯微成像中最重要的方法之一。但限于其本身不能有效避免背景信號及多焦面間的信號互擾,因此主要被用于單層細胞或厚度不超過50 μm組織切片(圖1)。否則,過厚的樣本將導致寬場成像變的模糊而無法用于發表論文或數據分析,如厚病理切片、培養皿中大量生長的活細胞(尤其懸浮細胞)、微孔板中的Colony、模式動物等樣本。
▲ 圖1. 大腦皮層神經元普通寬場成像
β-III-微管(綠色),細胞核(藍色)
21 µm厚細胞團59層普通寬場疊加圖像
您可能會說,我們可以用共聚焦成像嘛!
沒錯,共聚焦顯微鏡的確可以對厚樣本內部進行清晰成像,當然也可以進行層掃進而3D重建。但在實際使用中也存在局限性:
1、較寬場成像時間長,而很多生命過程十分迅速;
2、對于厚樣本,單層共聚焦圖像有時不能很好代表整體生物學信息,如單層共聚焦熒光成像往往不能有效代表腫瘤細胞球的整體蛋白表達。
2019萬物復蘇之際,
徠卡顯微系統隆重推出創新性產品——THUNDER 寬場高清成像系統!
THUNDER可以帶給您:
1、與普通寬場成像相同的成像速度!
2、與普通寬場成像大不相同的圖像清楚度!
3、與共聚焦相同的大樣本拼接、層掃和3D重建!
在此,小編只想借用德國馬普所(Max Planck Institute, MPI)心肺研究中心Almary Guerra博士的話表達對THUNDER的一見鐘情:
下面,讓我們一起去發現THUNDER帶來的寬場成像驚喜!
THUNDER Imager 3D Live Cell
▲ 圖2. 大腦皮層神經元THUNDER疊加圖像
(vs 圖1. 普通寬場結果)
THUNDER Imager 3D Cell Culture
▲ 圖3. HeLa細胞球成像,Alexa Fluor 568-鬼筆環肽標記細胞微絲(紅色)、YOYO 1碘化物標記細胞核(綠色)
THUNDER Imager Tissue
▲ 視頻1. 小鼠腎臟切片成像,Alexa Fluor 488 WGA,Alexa Fluor 568鬼筆環肽標和DAPI,樣片:FluoCells Prepared Slide #3
THUNDER Imager Model Organism
▲ 視頻2. 受精后72小時斑馬魚幼魚成像。血管(綠色),樣本來自:MPI研究所Almary Guerra博士
THUNDER 重新定義寬場成像
Let’s see through the haze !
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關于徠卡顯微系統Leica Microsystems
徠卡顯微系統是全球顯微科技與分析科學儀器之領導廠商之一,總部位于德國維茲拉(Wetzlar, Germany)。主要提供顯微結構與納米結構分析領域的研究級顯微鏡等專業科學儀器。自公司十九世紀成立以來,徠卡以其對光學成像的極致追求和不斷進取的創新精神始終得到業界廣泛認可。徠卡在復合顯微鏡、體視顯微鏡、數碼顯微系統、激光共聚焦掃描顯微系統、電子顯微鏡樣品制備和醫療手術顯微技術等多個顯微光學領域處于全球領先地位。
自創立至今,徠卡的光學足跡已遍及全球100多個國家。目前,徠卡在歐洲、亞洲與北美有6大產品研發與生產基地,在20多個國家設有銷售或服務支持中心,以及遍布全球的經銷商服務網絡。