背景
1989年研究人員首次發現駱駝和羊駝等駱駝科體內會產生一種獨特的抗體:
天然缺失輕鏈的重鏈抗體(HcAb),該抗體不像人工改造的單鏈抗體片段(scFv)那樣容易相互沾粘,甚至聚集成塊。該抗體只包含一個重鏈可變區(VHH)和兩個常規的CH2與CH3區,重要的是
單獨克隆并表達出來的VHH結構具有與原重鏈抗體相當的結構穩定性以及與抗原的結合活性,是目前已知的可結合目標抗原的最小單位。VHH晶體為2.5nm,長4nm,分子量只有15KDa,因此也被稱作納米抗體(Nanobody,Nb)。納米抗體作為一種新型抗體片段,沒有傳統抗體的輕重鏈,只保留了完整的抗原結合部位,
具有相對分子量小、特異性高、親和力強等特性,非常適合于替代傳統抗體。因此基于納米抗體開發出的Nanoselector Agarose Kit展示出了更好的應用前景。
Nanoselector Agarose Kit是HUABIO推出的新一代IP/CoIP試劑盒,通過將高親和力,高特異的納米抗體定點偶聯到瓊脂糖上,并搭配成套的各種緩沖液,
不但可以避開傳統方法抗體輕重鏈的干擾,還能方便實驗操作,節省時間。
GFP-Nanoselector Agarose是以駝源GFP納米抗體為配基的親和純化介質,其納米抗體體積更小親和力更高,高密度牢固地結合于agarose beads上,用于捕捉GFP蛋白。GFP-Nanoselector Agarose能高效且特異的識別GFP, mEGFP, superfolder GFP,CFP 和YFP 變體,但不與 mCherry, mRFP, dsRed, mTagBFP, mTagRFP 等交叉反應。通過GFP-Nanoselector Agarose kit完成IP /Co-IP /ChIP實驗,
可以使免疫沉淀更簡易,更便捷,更可靠,更專業,并且無傳統抗體的輕鏈和重鏈干擾。
產品優勢
極端穩定
由于納米抗體結構簡單,GFP-Nanoselector Agarose有著
極高穩定性。該產品在70℃仍保持穩定;此外,除了在生理性濃度鹽離子溶液中工作,GFP-Nanoselector Agarose可以
耐受高鹽、酸堿等惡劣環境,還能
耐受3M鹽酸胍,8M尿素,0.1% SDS等。其展現出的高穩定性為研究人員選擇不同的實驗條件提供了更多的可能。
高親和力、高結合力
通過嚴格的yeast display高通量篩選,挑選出高親和力和高特異性的GFP納米抗體,
其親和力低于1pM。
GFP-Nanoselector Agarose的高親和力提高了檢測的靈敏度,
既能穩定捕捉微量樣品中少量的GFP蛋白,也能完全捕捉高濃度樣品中的所有GFP蛋白。該產品極高的特異性保證了實驗的精確性,極大的降低了非特異性結合,顯著降低實驗各種背景干擾。
縮短孵化時間
由于納米抗體的高親和力的特性,GFP-Nanoselector Agarose能快速穩定的結合GFP蛋白(
只需5-30min),且多次試驗結果穩定,可重復性強。這既能保持實驗高效進行,又能節省實驗時間和成本。
無輕重鏈干擾
納米抗體結構單一,沒有傳統抗體的輕重鏈,在實驗環節的各種條件都不會輕易破壞抗體結構,使得洗脫產物沒有輕鏈重鏈的影響。無論是western blot 還是MS都不再有傳統輕重鏈的干擾,因此可以輕易地鑒定與GFP融合蛋白特異性結合的蛋白。
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