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AO-EB雙染試劑盒說明書

瀏覽次數(shù):5773 發(fā)布日期:2014-3-14  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
AO-EB雙染試劑盒說明書
貨號(hào):CA1140
規(guī)格:100ml/500ml
保存:4℃避光密封保存,有效期一年
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
吖啶橙能透過胞膜完整的細(xì)胞,嵌入細(xì)胞核DNA,與雙鏈DNA結(jié)合后發(fā)出綠色熒光,溴化乙錠(EB)僅能透過胞膜受損的細(xì)胞,嵌入核DNA,發(fā)橘紅色熒光。凋亡的細(xì)胞呈現(xiàn)為染色增強(qiáng),熒光更為明亮,均勻一致的圓狀或固縮狀、團(tuán)塊狀結(jié)構(gòu)。非凋亡細(xì)胞核呈現(xiàn)熒光深淺不一的結(jié)構(gòu)樣特征。二者很容易判別。在熒光顯微鏡下觀察,可見四種細(xì)胞形態(tài):活細(xì)胞(VN),核染色質(zhì)著綠色并呈正常結(jié)構(gòu);早期凋亡細(xì)胞(VA),核染色質(zhì)著綠色呈固縮狀或圓珠狀;晚期凋亡細(xì)胞(NVA),核染色質(zhì)為橘紅色并呈固縮狀或圓珠狀;非凋亡的死亡細(xì)胞(NVN),核染色質(zhì)著橘紅色并呈正常結(jié)構(gòu)。本產(chǎn)品AO、EB溶液濃度分別為100ug/ml,所含穩(wěn)定劑不影響實(shí)驗(yàn)效果。
使用方法:(僅供參考)
使用前先根據(jù)用量,將AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液,先用現(xiàn)配。
對(duì)于貼壁細(xì)胞或爬片,去掉培養(yǎng)基,用PBS洗兩遍去除殘余培養(yǎng)基和未貼壁細(xì)胞,加入新的PBS;如果需要觀察全部細(xì)胞特性,保留未貼壁細(xì)胞,可以直接在培養(yǎng)基中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,可直接加入工作液或離心收集細(xì)胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培養(yǎng)基或PBS中加入20ul工作液即可。室溫放置2-5min后于熒光顯微鏡下觀察。
注意事項(xiàng):
含酚紅培養(yǎng)基對(duì)觀察有輕微影響。建議使用無酚紅培養(yǎng)基。
染色液工作濃度和染色時(shí)間可根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)情況適當(dāng)調(diào)整,以期達(dá)到最佳效果。
相關(guān)試劑:
CA1020 ANNEXIN V-FITC/PI凋亡檢測(cè)試劑盒
CA1120 Hoechst 33342/PI雙染試劑盒
C0020 Hoechst 33258染色液(即用型)
C0060 DAPI溶液(1mg/ml)
31800 RPMI Medium 1640培養(yǎng)基
S9000 特級(jí)胎牛血清
發(fā)布者:北京索萊寶科技有限公司
聯(lián)系電話:010-50973127
E-mail:2079931930@qq.com

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