概述

氣相色譜柱一般分為填充柱和毛細(xì)管柱，填充柱適合常規(guī)樣品的定量分析，尤其是高純度的樣品；毛細(xì)管柱適合分離組成比較復(fù)雜或微量樣品以及殘留分析等。目前來(lái)說(shuō)，在常規(guī)樣品和高純樣品的定量分析時(shí)，經(jīng)常使用的還是填充柱。

氣相色譜儀不銹鋼填充柱

毛細(xì)管柱一般為商品柱，買來(lái)后，接上儀器，老化一下即可直接使用。填充柱，大多是自己制備的，填充柱的柱效和柱的制備有很大的關(guān)系，尤其是填充物的制備。

下面就以制備5%OV-101/ChromosorbWHP玻璃色譜柱為例，簡(jiǎn)單說(shuō)說(shuō)填充柱的制備。

一、色譜柱的制備

1、固定液的涂漬

稱取0.5g OV-101于200mL燒杯中，加入適量三氯甲烷溶解，將10 g干燥的Chromosorb W HP載體徐徐傾入，使載體完全浸沒。將燒杯置于通風(fēng)柜中，在紅外燈下干燥，并不斷攪拌至溶劑揮發(fā)干，然后移至110℃烘箱中干燥2h，備用。

2、色譜柱的填充

將一小漏斗接已經(jīng)洗滌干燥的色譜柱的出口，分次把制備好的填充物填入柱內(nèi)，同時(shí)不斷輕敲柱壁，直至填到離柱口1.5cm處為止。將玻璃漏斗移至色譜柱的入口，在出口端塞一小團(tuán)經(jīng)硅烷化處理的玻璃棉，并包以薄層棉花或2層紗布，通過(guò)橡皮管接到真空泵上，開啟真空泵，從漏斗處，繼續(xù)緩緩加入制備好的填充物，并不斷輕敲柱壁使其填充得均勻緊密。填充完畢，在入口端也塞一小團(tuán)經(jīng)硅烷化處理的玻璃棉，并適當(dāng)壓緊以保持柱內(nèi)填充物不被移動(dòng)。

3、色譜柱的老化

將色譜柱入口與氣化室相連，出口端先不接檢測(cè)器，以15mL/min流量通入載氣(N2)。分階段升溫至250℃,并在此溫度下至少老化24 h。

以上是采用氣相色譜法檢測(cè)一個(gè)農(nóng)藥有效成分的色譜柱制備典型操作。

二、注意事項(xiàng)

1、色譜柱的處理

a.玻璃柱：

新柱：接上膠管用清水直接沖洗約20分鐘，然后依次用蒸餾水、乙醇沖洗，于烘箱中干燥。

注：沖洗方法：用一個(gè)干凈的洗耳球吸入蒸餾水或乙醇，然后將液體用力擠入柱管中。

舊柱（指使用過(guò)的柱）：接上膠管先用清水直接沖洗約20分鐘，然后將稀酸（一般為0.1mol/L硝酸或鹽酸溶液）灌入柱管中，讓其浸泡2小時(shí)以上，再用清水沖洗至洗出液為中性，再以同樣方法注入乙醇或丙酮，浸泡2小時(shí)以上，然后依次用蒸餾水、乙醇沖洗，于烘箱中干燥。

b.不銹鋼柱：

新柱：洗滌、干燥方法同玻璃柱。

舊柱：洗滌、干燥方法同玻璃柱，但是，需把稀酸換為稀堿，一般為0.1mol/L氫氧化鈉溶液。

2、固定液涂漬時(shí)的溶劑量

固定液涂漬時(shí)的溶劑量是最不容易掌握的，通常資料介紹“取所需量的固定液，用適量（能浸過(guò)擔(dān)體）的溶劑溶解”，而“適量（能浸過(guò)擔(dān)體）的溶劑”到底是多少，一般很難掌握。在這里，告訴大家一個(gè)簡(jiǎn)單的方法，將所需要的載體稱量后，置于量筒中，量出其體積，這就是溶解固定液的溶劑的量。采用此方法溶解固定液后，再徐徐傾入載體，一般正好能浸沒載體，只要稍加攪拌，這樣制成的填充物涂布均勻，不會(huì)有涂層厚薄不勻，以致產(chǎn)生柱效差。如果溶劑過(guò)多，容易造成上層的載體涂層較厚，因?yàn)樯蠈右后w揮發(fā)較快。

3、填柱的方法

填柱時(shí)，要注意柱內(nèi)填充物的均勻緊密，一般不銹鋼柱比較好填，因?yàn)樵谇么蛑鶗r(shí)，用力較大也可。而玻璃柱就不容易了，敲打輕了，松緊度不夠，通入載氣后，柱內(nèi)會(huì)出現(xiàn)較大的空隙，造成死體積大，影響柱效；重了，不小心會(huì)將玻璃柱損壞，所以要注意敲打的力度。有時(shí)候，也會(huì)在柱子老化后，從入口處再次補(bǔ)加填充物。

4、色譜柱老化

色譜柱老化時(shí)，千萬(wàn)要注意不能接檢測(cè)器，否則，檢測(cè)器容易被污染。

老化溫度必須大于使用時(shí)的柱溫，這樣在做分析時(shí)基線會(huì)比較穩(wěn)。

老化時(shí)間，一般為連續(xù)24小時(shí)，如果有困難，也可以分時(shí)間段老化，只要基線穩(wěn)定即可。

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