Hieff Mut™ Multi Site-Directed Mutagenesis Kit多點突變試劑盒說明書
Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit是基于Hieff CloneTM快速克隆技術的定點突變系統。使用本試劑盒，可一次性向目標質粒上三至五個不連續位點（相距超過50bp）同時引入定點突變。該試劑盒由兩個模塊組成：HieffTM II Pfu DNA Polymerase擴增模塊和Hieff CloneTM快速克隆模塊。HieffTM II Pfu DNA Polymerase超高的保真度顯著降低了擴增過程中引入新突變的可能性，其卓越的長片段擴增能力，廣泛適用于長度小于20 kb的任何質粒擴增。Hieff CloneTM快速克隆系統利用高效的同源重組反應替代傳統的退火成環反應。因此使用Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit進行DNA定點突變時，引物設計更加靈活，且擴增反應以指數方式進行，極大減少了模板使用量，有利于原始甲基化模板的徹底降解。
Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit中的重組酶Exnase MultiS經過優化，專門針對多堿基進行定點突變。此外，如擴增產物特異，其DpnI消化產物可不進行DNA純化而直接用于重組反應。高度優化的反應緩沖液、快捷的操作流程以及極高的成功率，使得Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit成為DNA多點突變首選試劑盒。
應用范圍
DNA定點突變
【注】：如使用本品對質粒進行定點突變，請使用甲基化酶無缺陷的宿主菌 (例如Top10、DH5α、JM109)擴增原始質粒！
產品組成
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編號 |
組分 |
產品編號/規格 |
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11004ES10 （10 T） |
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11004-A |
2×HieffTM II PCR buffer |
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11004-B |
dNTP Mix (10 mM each) |
50 μl |
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11004-C |
HieffTM II Pfu DNA Polymerase (1 U/μl) |
50 μl |
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11004-D |
Dpn I (10 U/μl) |
50 μl |
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11004-E |
2× Hieff Clone MultiS Enzyme Premix |
100 μl |
運輸與保存方法
冰袋（wet ice）運輸。產品-20 ºC保存。有效期1年。
不連續多堿基（相距超過50bp）定點突變實驗流程（以不連續三堿基為例）
