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如何從細胞和組織提取物中有效分離和富集K48-多聚泛素?

瀏覽次數:2826 發布日期:2019-10-25  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

前情回顧

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【2】通用的泛素化蛋白富集純化神器,TUBEs,點擊了解

【3】泛素化研究最常用的樣品制備抑制劑,PR-619,點擊了解

【4】K63特異性去泛素化酶抑制劑,1,10 phenanthroline,點擊了解

【5】K63多聚泛素的分離和富集方案,點擊了解

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泛素(Ubiquitin,Ub)對蛋白質的翻譯后修飾,對它們的區室化,降解和功能產生了深遠的影響。單個Ub與靶蛋白的結合被稱為單泛素化,另外的Ub部分可以與該初始Ub綴合,形成多聚泛素(polyUb)鏈。這些polyUb鏈通過Ub的C末端與靶蛋白的賴氨酸之間形成異肽鍵而連接。PolyUb鏈本身通過各個單體Ub單元之間的類似綴合機制形成,并且可以通過Ub中存在的所有賴氨酸(K6,K11,K27,K29,K33,K48和K63)連接。

兩種表征的最充分的多泛素化形式是通過連接在賴氨酸48(K48)或賴氨酸63(K63)上發生的。K48連接多聚泛素化最常見的后果是蛋白酶體介導的降解,而K63連接的多泛素化修飾與其他細胞過程有關,DNA損傷反應的調節,胞內分選,錯誤折疊/聚集蛋白的自噬和神經變性。其它賴氨酸的多聚泛素蛋白連接尚不顯著,其生理作用仍然大部分未知。 

什么是TUBE

TUBE(Tandem Ubiquitin Binding Entities, 串聯泛素結合實體),基于已知具有對泛素親和力的蛋白質結構域,經過深度整合,創造性地開發出了TUBEs結合實體。與單泛素結合相關結構域(UBA)相比,TUBE對多泛素部分的親和力可增加高達1000倍。此外,TUBE對多泛素化蛋白質具有保護作用,允許以相對低的豐度進行檢測。這些特性有助于有效地“捕獲”多泛素化狀態的蛋白質。

如何從細胞和組織提取物中有效分離和富集K48-多聚泛素以便用于蛋白質組學的研究?艾美捷科技為您推薦由泛素研究的引領者-LifeSensors-推出的高品質高性能的K48泛素鏈特異性的串聯結合實體(K48 TUBE HF),已被廣大泛素領域科學家廣泛使用。

產品名稱及描述

貨號

規格

偶聯物

K48 TUBE HF, GST

UM107

50µg/250µg

GST標簽

K48 TUBE HF,  His6

UM207

50µg/250µg

His6標簽

K48 TUBE HF, Biotin

UM307

50µg/250µg

生物素

K48 TUBE HF, Magnetic

UM407M

1 ml

磁珠

K48 TUBE HF, TAMRA

UM507T

50µg

TAMRA標簽

K48 TUBE HF, Fluorescein

UM507F

50µg

熒光素標簽

K48 TUBE HF, FLAG

UM607

50µg/250µg

Flag標簽

PS:

與其它連接類型相比,K48泛素鏈特異性的串聯結合實體K48-TUBE HF(高保真的第二代)對K48鏈的多聚泛蛋白的親和力和選擇性會強上100倍,是一種極度靈敏且經濟的工具。此外,LifeSensors公司對于K48-TUBE HF進行了不同的標簽修飾,可以滿足不同研究者的多樣化實驗需求。

K48泛素鏈特異性的串聯結合實體優點:

  1. 對K48多聚泛素鏈的納摩爾親和力;

  2. 對K48多聚泛素鏈的親和力與其它所有連接相比高100倍;

  3. 與大多數泛素抗體相比,TUBE對多聚泛素的親和力更高;

  4. 避免表位標記的泛素過表達導致下拉。

【廠家測試結果——UM607】:

【廠家測試結果——UM107,UM207,UM307,UM407M】:

真實客戶評論:

“我的實驗室最近發表了兩篇文章,報告了FLAG-K63和FLAG K48 TUBE試劑的使用。我們使用這些試劑來研究細胞E3連接酶MARCH8對丙型肝炎病毒非結構性跨膜蛋白(HCV)的泛素化作用。這些試劑具有很高的選擇性和易操作性,有助于我們表征特定的泛素修飾。”- Shirit Einav博士,斯坦福大學醫學院微生物和免疫學系副教授

LifeSensors成立于1996年,位于美國賓夕法尼亞州費城,是一家為藥物發現與研究提供方法和可行性技術方法的生物技術公司。公司致力于為泛素和泛素蛋白酶體通路研究領域提供高品質的抗體、酶、蛋白質等試劑和試劑盒,產品最全、最新,是泛素研究者的最佳選擇。其原核和真核蛋白表達系統SUMOpro和SUMOstar已被世界范圍內的學術、政府研究機構和制藥、生物技術公司廣泛應用。通過提供創新的研究工具,LifeSensors已成為泛素和泛素樣蛋白途徑的領導者。

艾美捷科技與國內外優秀的生物試劑供應商保持著密切的合作關系,目前已成為眾多國際知名品牌的中國總代理或一級代理,主要包括:AAT Bioquest、Abnova、Agrisera、Alomone Labs、Abbkine、Biovision、Biosensis、Cayman Chemical、Caisson Labs、Cytoskeleton、Epigentek、Equitech-Bio、Hycult Biotech、Jackson、LifeSensors、ProSpec、Norgen Biotek、Mabtech、iRegene、StressMarq、Trevigen、ImmunoReagents、SouthernBiotech、Origene、US Biological、Solis BioDyne等,可以在第一時間為用戶提供最前沿的專業資訊、完備的產品及物流服務。

作為LifeSensors在中國的區域總代理,艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供最全面的LifeSensors產品以及訂制服務。

艾美捷咨詢熱線

發布者:艾美捷科技有限公司
聯系電話:400-6800-868 027-59626688
E-mail:sales@amyjet.com

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