人曲霉菌抗原(AspergillusAg)ELISA試劑盒操作步驟
瀏覽次數:219 發布日期:2020-2-21
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人曲霉菌抗原(AspergillusAg)ELISA試劑盒操作步驟
.編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品0μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同3。
8.洗滌:操作同5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色5分鐘.
0.終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
.測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后5分鐘以內進行。