DNA凝膠回收試劑盒使用說明書
| DNA凝膠回收試劑盒在原有產品的基礎上進行了改良，其優點為能更快更好的溶膠，回收的效率更高。該凝膠回收試劑盒采用機械切割的硅膠膜吸附材料作為離心吸附柱，應用優化好的特定緩沖液，可選擇性地結合回收目標DNA，去除污染雜質；溶膠液的溶膠效率高，適用于TAE和TBE 緩沖液；使用海基DNA凝膠回收試劑盒每次可純化得到高達40 μg的DNA片段(70 bp～20 Kb)，回收率高達70～95％。回收的產物可用于PCR、酶切、連接反應、測序等各種分子生物學實驗。 | ||||||||||||
組分 |
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注意事項：首次使用Washing Buffer（洗滌液）時應加入80 ml無水乙醇并混勻，請及時做好標記。 |
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儲存 |
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| 室溫避光保存，可儲存一年。 | ||||||||||||
使用方法 |
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| 1. 在瓊脂糖凝膠-EB電泳后，在紫外燈上小心的把所需的DNA片段切下，盡量去除多余的凝膠并盡量少帶電泳緩沖液，稱重，裝入1.5 ml離心管。 2. 按照凝膠的重量近似的估計其體積，假設其密度為1g/ml，凝膠的體積可按如下方法計算：若凝膠薄片的重量為0.2 g，則其體積為0.2 ml。 3. 在上述離心管中加入3倍體積的Gel Buffer 1（如0.2 g膠，加入600ul Gel Buffer 1），顛倒混勻后放入50℃ 水浴鍋中加熱5~10 min。每隔2 min顛倒混勻一次。 4. 溶膠后，加入0.1倍Gel Buffer 1體積的Gel Buffer 2（如0.2 g膠，加入了600ul Gel Buffer 1， 再加入60ul Gel Buffer 2），混合均勻，此時溶液應為澄清黃色。 5. 待溶液冷卻至室溫，然后將溶液直接倒入吸附柱中， 13,000rpm室溫離心30 s。 6. 再次將過柱液倒入吸附柱中，13,000rpm室溫離心30 s，倒掉收集管中的液體。 7. 向吸附柱中加入500 μl Washing Buffer（確認已加入乙醇），13,000rpm室溫離心30 s，棄收集管中廢液。 8. 重復步驟7一次。 9. 將吸附柱重新放入套管中，再13,000rpm室溫離心2 min。 10. 將吸附柱置于1.5 ml離心管上，靜置2 min，使痕量乙醇完全揮發后加入20~30 μl Elution Buffer至管內柱面上，放置1分鐘。 11. 13,000rpm室溫離心2 min，所得液體即為回收的DNA溶液。 |
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