分離純化領(lǐng)域之大變革-徑向?qū)游龅臅r代來臨
NO.1 什么是徑向?qū)游黾夹g(shù)？
通常，徑向?qū)酉抵辛鲃酉鄰闹敳窟M入，后通過管路分散至外擋板，后垂直與中軸徑向往內(nèi)擋板流動，填料即裝載與內(nèi)外擋板之間，如下圖所示：
NO.2 徑向?qū)游黾夹g(shù)有什么優(yōu)勢
>>>>優(yōu)勢1：反壓更低、保護填料，增加填料利用率
分別使用2種填料以相同流速測試傳統(tǒng)軸向工藝（Axial）和徑向工藝（Radial）的系統(tǒng)反壓, 對比列表如下：
表中可見，相同流速徑向工藝大幅降低系統(tǒng)反壓，有效防止過高壓力壓碎填料，尤其是使用軟膠工藝的產(chǎn)品，有效提升填料使用次數(shù)，提高使用率。
>>>>優(yōu)勢2：更快，時間成本節(jié)省4倍以上
Courtesy：University of Nebraska
表中可見，傳統(tǒng)軸向工藝層析時間是徑向工藝的18倍。
特別是在生物制品原液中試及生產(chǎn)領(lǐng)域，徑向?qū)游龉に嚹軌虼蟠罂s短工藝時間，提升層析效率，降低時間成本。
另外，徑向?qū)游鲋軌蛴行Ы档推胶馑璧木彌_液體積，節(jié)省試劑成本及平衡時間，對比數(shù)據(jù)如下：
>>>>優(yōu)勢3：柱效更好、分辨率更高
使用相同體積填料的徑向柱及軸向柱分離相同的卵轉(zhuǎn)鐵蛋白與牛血清白蛋白的混合物，峰型及對比數(shù)據(jù)如下：
圖中可見，由于徑向?qū)游霆毺氐慕Y(jié)構(gòu)設(shè)計，相比于傳統(tǒng)軸向柱呈現(xiàn)出更好的柱效及分辨率，有利于難分離的蛋白質(zhì)的分離純化。對稱性As對比數(shù)據(jù)如下：
圖中可見，徑向工藝裝柱塔板數(shù)顯著高于軸向柱，為更好的分離純化效果提供了有利的支持。
>>>>優(yōu)勢4：防止蛋白柱上降解及沉淀，提高收率
層析工藝中樣品通常富集在層析柱頂部，濃度呈現(xiàn)水滴狀分布，靠近頂部出液口的填料負載較高的樣品濃度，進而向周圍擴散，層析柱底部濃度最低，尤其是未滿載上樣時。
對于某些疏水性較強樣品，其穩(wěn)定性受柱上富集樣品濃度影響較大，較高的濃度通常導致柱上富集沉淀，進而收率降低。而Superflo柱（徑向工藝）層析柱頂部出液口不只一處，而是若干出口均勻分布于上表面，產(chǎn)生均勻的頂部樣品分布，另外徑向工藝層析柱的上表面積顯著大于下表面積，進一步降低了樣品富集后的柱上濃度，更有利于樣品穩(wěn)定，產(chǎn)生高收率。
另外，由于徑向工藝快速的線性流速及更短的層析時間，降低了樣品柱上降解的可能性，針對于易于降解的樣品有利于快速收獲后進一步防降解處理。
NO.3 徑向?qū)游黾夹g(shù)之問
01徑向?qū)游鲋绾螌崿F(xiàn)反壓更低、流速更快，層析時間節(jié)省？
02徑向?qū)游鍪褂酶缶�性流速是否會降低樣品載量及收率？
03徑向?qū)游鲋绾我子诜糯笄曳糯蠛笳嫉馗。?/strong>
04徑向?qū)游鲋绾螌崿F(xiàn)無需拆卸即可進行填料安裝和卸除？
傳統(tǒng)的軸向流層析技術(shù)中，其流體在柱內(nèi)從一端流向另一端，通常是柱上端往下端流動，液流方向沿著中軸重力方向向下流動。
而徑向?qū)游黾夹g(shù)不同于傳統(tǒng)的軸向流層析技術(shù)，徑向流色譜柱流動相攜帶樣品沿徑向遷移。徑向?qū)游鲋O(shè)計成了套筒狀，即填料形狀不是傳統(tǒng)的柱狀，而是類似于甜甜圈的形狀，層析柱包含內(nèi)外表面，中間通道裝載填料。軸向與徑向?qū)游鲆毫髁髀啡缦滤荆?/span>
通常，徑向?qū)酉抵辛鲃酉鄰闹敳窟M入，后通過管路分散至外擋板，后垂直與中軸徑向往內(nèi)擋板流動，填料即裝載與內(nèi)外擋板之間，如下圖所示：
NO.2 徑向?qū)游黾夹g(shù)有什么優(yōu)勢
>>>>優(yōu)勢1：反壓更低、保護填料，增加填料利用率
分別使用2種填料以相同流速測試傳統(tǒng)軸向工藝（Axial）和徑向工藝（Radial）的系統(tǒng)反壓, 對比列表如下：
表中可見，相同流速徑向工藝大幅降低系統(tǒng)反壓，有效防止過高壓力壓碎填料，尤其是使用軟膠工藝的產(chǎn)品，有效提升填料使用次數(shù)，提高使用率。
>>>>優(yōu)勢2：更快，時間成本節(jié)省4倍以上
下表為徑向工藝和傳統(tǒng)軸向工藝疏水層析柱分離蛋白比對
Courtesy：University of Nebraska
特別是在生物制品原液中試及生產(chǎn)領(lǐng)域，徑向?qū)游龉に嚹軌虼蟠罂s短工藝時間，提升層析效率，降低時間成本。
另外，徑向?qū)游鲋軌蛴行Ы档推胶馑璧木彌_液體積，節(jié)省試劑成本及平衡時間，對比數(shù)據(jù)如下：
>>>>優(yōu)勢3：柱效更好、分辨率更高
使用相同體積填料的徑向柱及軸向柱分離相同的卵轉(zhuǎn)鐵蛋白與牛血清白蛋白的混合物，峰型及對比數(shù)據(jù)如下：
圖中可見，由于徑向?qū)游霆毺氐慕Y(jié)構(gòu)設(shè)計，相比于傳統(tǒng)軸向柱呈現(xiàn)出更好的柱效及分辨率，有利于難分離的蛋白質(zhì)的分離純化。對稱性As對比數(shù)據(jù)如下：
塔板數(shù)對比數(shù)據(jù)如下：
圖中可見，徑向工藝裝柱塔板數(shù)顯著高于軸向柱，為更好的分離純化效果提供了有利的支持。
>>>>優(yōu)勢4：防止蛋白柱上降解及沉淀，提高收率
層析工藝中樣品通常富集在層析柱頂部，濃度呈現(xiàn)水滴狀分布，靠近頂部出液口的填料負載較高的樣品濃度，進而向周圍擴散，層析柱底部濃度最低，尤其是未滿載上樣時。
對于某些疏水性較強樣品，其穩(wěn)定性受柱上富集樣品濃度影響較大，較高的濃度通常導致柱上富集沉淀，進而收率降低。而Superflo柱（徑向工藝）層析柱頂部出液口不只一處，而是若干出口均勻分布于上表面，產(chǎn)生均勻的頂部樣品分布，另外徑向工藝層析柱的上表面積顯著大于下表面積，進一步降低了樣品富集后的柱上濃度，更有利于樣品穩(wěn)定，產(chǎn)生高收率。
另外，由于徑向工藝快速的線性流速及更短的層析時間，降低了樣品柱上降解的可能性，針對于易于降解的樣品有利于快速收獲后進一步防降解處理。
NO.3 徑向?qū)游黾夹g(shù)之問
01徑向?qū)游鲋绾螌崿F(xiàn)反壓更低、流速更快，層析時間節(jié)省？
答：生物制品工藝中傳統(tǒng)軸向柱的裝柱高度在20cm左右，個別廠商甚至達到30cm,較高的裝柱高度帶來較大的反壓，限制層析流速提升，層析時間較長，而Superflo柱（徑向工藝）中試裝柱高度低至5cm,生產(chǎn)級別高度低至10cm,另外填料上表面積大于下表面積，從而帶來更低的反壓及更高的層析效率。
02徑向?qū)游鍪褂酶缶�性流速是否會降低樣品載量及收率？
答：徑向色譜中高達0.5CV/min線性流速、保留時間低至2min依然保持90%以上的回收率，徑向?qū)游霾粫档蜆悠份d量及收率，甚至客戶還可進一步提升線性速度追求高效率。
03徑向?qū)游鲋绾我子诜糯笄曳糯蠛笳嫉馗。?/strong>
答：Superflo柱（徑向工藝）的放大依然遵循線性放大原則，床深不變，只需要增加縱向高度，放大后仍然是修長柱狀，而非傳統(tǒng)柱的矮胖狀。
04徑向?qū)游鲋绾螌崿F(xiàn)無需拆卸即可進行填料安裝和卸除？
答：無需拆開柱子，只需要使用蠕動泵配合壓力表填裝填料漿液和拆除沖洗即可完成填料拆裝。
NO.4 徑向?qū)游黾夹g(shù)全工藝解決方案供應商
廣州市艾貝泰生物科技有限公司立足于生物工藝的優(yōu)化、放大及生產(chǎn)，除了為國內(nèi)客戶提供高品質(zhì)的Applikon生物反應器，還引進了國外先進的產(chǎn)品，如Nova生化分析儀、Cytena克隆篩選單細胞打印機系統(tǒng)、Kaiser拉曼在線生物工藝分析儀、Flownamics在線取樣器、Sepragen徑向?qū)游鱿到y(tǒng)、Constant Systems高壓細胞破碎儀等。為滿足生物制藥行業(yè)高速發(fā)展的需要，艾貝泰也專業(yè)研發(fā)和生產(chǎn)一次性使用的生物工藝設(shè)備和耗材。艾貝泰不斷完善生物制藥領(lǐng)域的產(chǎn)品線，為用戶提供全方位的專業(yè)產(chǎn)品解決方案。標簽：
分離純化
徑向?qū)游?/a>
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