雜交瘤細胞（hybridoma）是一種在制備單克隆抗體過程中，用骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合而成的細胞。雜交瘤細胞一般通過瘤細胞培養來制備。雜交瘤技術是指兩個或兩個以上細胞合并形成一個細胞的現象。他可使兩個不同來源的細胞核在同一細胞中表達功能。
 
雜交瘤細胞培養方法：
 
1） 瘤細胞培養（無特殊要求）
 
2）免疫小鼠和脾細胞的制備
 
3）飼細胞的制備：常用小鼠胸腺細胞或小鼠的腹腔細胞
 
4）細胞融合
 
融合方法一：
1．將 1ml 40%的 PEG 液一滴滴加入到細胞團中，在 60 秒內加完，同時并不斷輕微轉動離 心管或用手指輕彈離心管。
2．在不斷轉動離心管中加 1ml 無血清培養液，60 秒鐘內加完。
3．于 5 分鐘內慢慢加完 20ml 無血清培養基。此時細胞對機械損傷非常敏感。
4．離心（800 轉/分，8 分鐘） ，去上清，用完全培養液 10ml 懸浮，輕輕混勻。
5．取 96 孔板，每孔加 50 微升。
6．取等體積細胞懸液，向另一 96 孔板中加 50 微升。
7．送入 5%CO2 溫箱中 37℃培養，24 小時后更換成 HAT 選擇性培養液。
 
融合方法二：
1．加 0.2ml 43%的 PEG 于離心管中。
2．用預先消毒的細玻璃針伸入管中輕輕攪動細胞團。
3．室溫中置 2 分鐘。
4．加入 10ml 完全培養液。
5．800 轉/分離心 5 分鐘。
6． 2 倍 HAT 培養液培養懸浮細胞， 24 孔板， 用 取 每孔中加 0.5ml， 96 孔板每孔中加 0.1ml。 另 7．5%CO2 溫箱，37℃，一周后第一次更換培養液，培養板中預先接種有飼養細胞，加 2× HAT 選擇培養液與原等量培養液混合后，即成為 1×的 HAT 培養基。
 
5）融合后細胞培養
 
6）抗體的檢測
 
常用方法：免疫熒光試驗、放射免疫試驗（RIA） ，酶聯免疫吸附試驗（ELISA）等。
 
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