創(chuàng)傷性腦損傷（TBI）是全球?qū)е滤劳龊蜌埣驳闹饕�原因。它不僅造成身體傷害，還會(huì)引起更嚴(yán)重的大腦內(nèi)部的一系列炎癥反應(yīng)，往往會(huì)導(dǎo)致終身殘疾�，F(xiàn)有的治療方法基本無(wú)法減少這種二次傷害。然而，利用新的調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞（Treg）和間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞（MSCs）聯(lián)合療法來(lái)調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞的反應(yīng)，可能會(huì)為治療腦外傷帶來(lái)希望1。

創(chuàng)傷性腦損傷的炎癥反應(yīng)

小膠質(zhì)細(xì)胞，即所謂的大腦免疫細(xì)胞，在創(chuàng)傷性腦損傷的炎癥反應(yīng)中至關(guān)重要。這些細(xì)胞被激活后，繼發(fā)的腦損傷和病理變化會(huì)持續(xù)數(shù)年2。這種反應(yīng)涉及中樞神經(jīng)系統(tǒng)（CNS）和全身免疫系統(tǒng)細(xì)胞之間復(fù)雜的相互作用。細(xì)胞治療解決這種反應(yīng)的方法之一是借助調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）3。
 

這項(xiàng)新研究的作者以前曾探索過(guò)使用人間充質(zhì)干細(xì)胞和臍帶血來(lái)源的Treg療法來(lái)減輕創(chuàng)傷性腦損傷后的炎癥反應(yīng)4，這兩種療法都顯示出了減輕神經(jīng)炎癥反應(yīng)的潛力，都能與宿主免疫系統(tǒng)發(fā)生相互作用。然而，為了在這項(xiàng)工作的基礎(chǔ)上更進(jìn)一步，他們推測(cè)兩種療法的結(jié)合可能會(huì)比單獨(dú)使用其中一種療法帶來(lái)更大的益處。

調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)+間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(MSCs)聯(lián)合療法： 調(diào)節(jié)小膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)

研究小組著手驗(yàn)證人調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)+間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(MSCs)聯(lián)合療法以及二者單一療法對(duì)創(chuàng)傷性腦損傷后炎癥反應(yīng)的療效，以此作為治療創(chuàng)傷性腦損傷的潛在新療法。他們首先使用活細(xì)胞流式細(xì)胞術(shù)對(duì)活小膠質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行免疫分型，建立合適的細(xì)胞群（圖1）。

小膠質(zhì)細(xì)胞的鑒定

圖 1. 小膠質(zhì)細(xì)胞圈門策略和多色流式組合。(A): 所示為假性和 CCI 組的代表性樣本。單細(xì)胞群根據(jù) SSC 和 FSC 進(jìn)行鑒定。7-AAD 陰性為活細(xì)胞。小膠質(zhì)細(xì)胞的鑒定采用兩步法。首先，選取 CD11b/c+ 細(xì)胞（PE-Cy7）來(lái)鑒定所有髓系細(xì)胞。然后用 P2Y12（FITC）和 CD45（APC-Cy7）對(duì) CD11b/c+ 細(xì)胞進(jìn)行圈門。三指標(biāo)陽(yáng)性細(xì)胞為小膠質(zhì)細(xì)胞。SSC：側(cè)向散射；FSC：正向散射。(B): 用于外周髓系細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞鑒定及免疫分型的多色流式抗體組合。圖片和圖例來(lái)自 Caplan, H. W., et al. Stem Cells. 2021;39(3):358-370.

在此基礎(chǔ)上，他們?cè)隗w外研究了調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)+間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(MSCs)聯(lián)合療法對(duì)大鼠脾細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用，以及對(duì)分選的大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞的免疫調(diào)節(jié)作用，以此作為一種可能的創(chuàng)傷性腦損傷新療法。在脾細(xì)胞中，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)+間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(MSCs)聯(lián)合療法比Treg或MSC單一療法更有效地減少了TNFα和IFNγ等關(guān)鍵促炎因子的產(chǎn)生。在減少 IFNγ 和其他幾種細(xì)胞因子（如 MCP-1、GM-CSF、IL-17A 和 IL-6）方面尤為明顯。當(dāng)他們觀察大鼠小膠質(zhì)細(xì)胞的原代培養(yǎng)物時(shí)，聯(lián)合療法也能持續(xù)抑制炎癥反應(yīng)，并對(duì)活化的小膠質(zhì)細(xì)胞在細(xì)胞因子的產(chǎn)生和表面表型方面顯示出不同的效果。
 

體外實(shí)驗(yàn)有了一個(gè)良好的開(kāi)端。最后，研究人員轉(zhuǎn)入體內(nèi)研究，看看這種調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)+間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(MSCs)聯(lián)合療法是否能像體外那樣調(diào)節(jié)創(chuàng)傷性腦損傷后的小膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)。通過(guò)使用特定的時(shí)間輸注Treg和MSC，他們證明這種療法確實(shí)能在14天后（炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵階段）成功減少大腦中的小膠質(zhì)細(xì)胞增生。這些結(jié)果不僅與體外研究結(jié)果一致，而且還表明了時(shí)機(jī)選擇和多次輸注在取得療效方面的重要性，從而有可能開(kāi)發(fā)出一種治療創(chuàng)傷性腦損傷的新療法。
 

總體而言，他們發(fā)現(xiàn)所有療法都能降低小膠質(zhì)細(xì)胞活化的標(biāo)志物，與單一療法相比，聯(lián)合療法能顯著降低全身炎癥反應(yīng)。此外，治療時(shí)機(jī)也是一個(gè)重要因素：在實(shí)驗(yàn)室測(cè)試和動(dòng)物模型中，交錯(cuò)使用調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)+間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(MSCs)療法（即在不同時(shí)間進(jìn)行治療）被證明更為有效。

聯(lián)合治療是大勢(shì)所趨

根據(jù)早期階段的研究結(jié)果，調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg) 與間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(MSCs) 的聯(lián)合療法為探索腦外傷新療法提供一個(gè)新方向。通過(guò)減輕小膠質(zhì)細(xì)胞的異常增生和炎癥反應(yīng)，聯(lián)合療法在實(shí)驗(yàn)室和動(dòng)物模型中的效果都優(yōu)于單一療法。
 

最重要的是，該研究對(duì)治療時(shí)機(jī)的見(jiàn)解對(duì)任何新的創(chuàng)傷性腦損傷治療方法都具有重要意義。調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)與間充質(zhì)基質(zhì)細(xì)胞(MSCs)的聯(lián)合療法代表著我們?cè)诶斫夂椭委焺?chuàng)傷性腦損傷的炎癥反應(yīng)方面邁出了重要一步，隨著研究的進(jìn)一步推動(dòng)，它將為開(kāi)發(fā)治療創(chuàng)傷性腦損傷的新療法釋放更多潛力。

文中相關(guān)文獻(xiàn)：

1.Stem Cells. 2021 Mar;39(3):358-370. doi: 10.1002/stem.3320. Epub 2020 Dec 31. PMID: 33368792; PMCID: PMC8634698.

2.Ann Neurol. 2011 Sep;70(3):374-83. doi: 10.1002/ana.22455. Epub 2011 Jun 27. PMID: 21710619.

3.Stem Cells Transl Med. 2020 Aug;9(8):903-916. doi: 10.1002/sctm.19-0444. Epub 2020 May 7. PMID: 32383348; PMCID: PMC7381810.

4.Stem Cells Transl Med. 2020 Aug;9(8):903-916. doi: 10.1002/sctm.19-0444. Epub 2020 May 7. PMID: 32383348; PMCID: PMC7381810.