介紹
準確、快速地處理通過拭子和FTA卡基質收集的血液或口腔樣本對法醫實驗室的高效運作至關重要。GlobalFiler™ Express Kit*是一種STR多重檢測方法,能夠從拭子和FTA卡打孔器以及其他的參考樣本中直接擴增。本應用說明介紹了如何使用FORMULATRIX公司的MANTIS系統將GlobalFiler™ Express Kit的預混液分配到帶有經處理的口腔FTA卡打孔器的擴增板上。
材料和方法
在添加 GlobalFiler™ Express Kit 試劑之前,將經處理且帶有樣品的1.2 mm紙盤添加到所需數量的反應孔中。根據供應商的說明指導對GlobalFiler™ Express Kit 試劑進行處理,用于對經處理的FTA卡的 26次 循環直接擴增。
簡而言之,通過將每個樣品的以下體積組合在一起來制備預混液:6.0 μL 預混液、6.0 μL 引物組和 3.0 μL 低 TE 緩沖液。使用MANTIS 液體處理器(圖 1)將 15 μL 預混液分配到 MicroAmp™ 光學 96 孔反應板上。隨后的擴增產物在 Applied Biosystems 3500xl 基因分析儀上進行處理,并使用 GeneMapper™ ID-X 軟件 v1.4 進行分析。
結果
在 17 次對經處理的口腔FTA卡打孔器的測試中,每次均使用 26 次循環 PCR 擴增生成完整圖譜(圖 2)。 所有擴增對照(兩個陽性和兩個陰性對照)也得到了預期的結果。
結論
GlobalFiler™ Express PCR 擴增試劑盒和FORMULATRIX公司的MANTIS 液體處理器的組合創建了一個用于生成PCR圖譜的高效系統。 GlobalFiler™ Express的化學反應免除了在擴增前提取和定量 DNA的需要。MANTIS強大且精確地將 GlobalFiler™ Express 預混液自動分配到擴增板上,并通過簡單易用的軟件控制最小死體積。自動打孔機器人和 LIMS 系統的集成構成了一個完整的系統,用于處理具有完整監管鏈的FTA卡打孔器。