免疫系統調節人體的各種生理過程。因此,提高機體免疫力,增強免疫功能,對于預防疾病的發生,恢復健康至關重要。活化的巨噬細胞可直接或間接參與免疫系統的免疫反應,通過吞噬作用清除抗原異物、衰老細胞和細胞碎片,進而分泌活性氧、活性氮和促炎因子。
巨噬細胞(Macrophages)屬免疫細胞,有多種功能,是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。小鼠巨噬細胞樣細胞系RAW264.7是醫學研究中最常用的小鼠巨噬細胞細胞系,RAW264.7細胞株是約30年前從生長在BAB/14小鼠體內的腫瘤中獲得的,這是一種BALB/c IgH同源株,接種了Abelson小鼠白血病病毒(MuLV)。
巨噬細胞的形態會隨著細胞活性、功能、環境和藥物的改變而改變。例如,相關研究顯示一種低分子量肽(NJP)處理引起RAW264.7細胞形態學改變,胞體增大呈圓形和不規則形狀,偽足擴張,而正常對照組巨噬細胞呈圓形,形態正常。很多實驗者發現在RAW264.7細胞正常培養中,細胞也會出現多邊形和不規則形狀,并伴有許多偽足的生成,細胞貼壁能力超強。
據了解,實驗者甚至用0.25%的胰酶消化30min,結果細胞仍“無動于衷”。
經過本公司技術員不斷探究,
總結出了關于RAW264.7細胞培養的若干注意事項,
希望可以幫到大家。
培養注意事項
1. 該細胞傳代時不需要用胰酶消化。傳代時,吸走部分培養液,留下少許培養液(如T25培養瓶留下7-8ml),用無菌細胞刮刮拭培養表面將細胞刮落,吹打后接種到新的裝有新鮮培養液的培養瓶內。
2. 該株巨噬細胞形態上包含松散貼壁的紡錘形和圓形或者立方形的細胞。當細胞密度較大時,細胞會輕微脫落變圓或者許多細胞堆在一起,有些細胞甚至脫落漂浮,這些漂浮的細胞是存活的,在傳代時應收集起來離心,細胞沉淀可以繼續培養。
3. 血清質量差異可能引起細胞貼壁能力變化,應選用高質量的胎牛血清。
4. 培養條件、運輸、環境變化等因素會影響此細胞的狀態,因此收到細胞后需要調整一段時間,請耐心培養。
5. 強烈推薦使用本公司對應的培養基,減少細胞培養過程的變因。
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