許多膽堿能藥物已被用于分析特定的突變體和行為;然而，對秀麗隱桿線蟲神經(jīng)生物學(xué)影響最大的兩種藥物是涕-滅-威和左旋咪唑。使用WMicrotracker SMART，可以很容易地量化乙酰膽堿通道調(diào)節(jié)劑的作用和動力學(xué)，以及其他參與行為的神經(jīng)元通道。WMicrotracker SMART是我們的新技術(shù)，通過它你可以獲得小動物種群在時間和空間上的行為的詳細(xì)信息，包括多蠕蟲路徑跟蹤。下面我們給出一個應(yīng)用程序示例。

P35中左旋咪唑?qū)π沱愲[桿線蟲麻痹的動力學(xué)研究
 
WMicrotracker SMART能夠獲取并繪制一群蠕蟲的路徑跟蹤，實時計算平均移動速度。左旋咪唑濃度處理(0至200uM)的動力學(xué)圖如下所示。圖中顯示了左旋咪唑濃度與運動速度下降的相關(guān)性。

利用每小時5分鐘的采集延時，WMicrotracker SMART能夠量化左旋咪唑麻痹對秀麗隱桿線蟲的影響。

Protocol步驟：

1，在NGM培養(yǎng)皿中同步培養(yǎng)日1蟲成蟲種群(OP50)。
2，用M9緩沖液將蠕蟲從培養(yǎng)皿中取出，并將其轉(zhuǎn)移到無菌2ml微管中。
3，讓蟲子靜下來。倒入上清，注意不要擾亂顆粒；
4，用2ml M9緩沖液進行清洗。短暫搖動或翻轉(zhuǎn)試管；
5，重復(fù)上述步驟。把上清倒掉；
6，加入2ml M9緩沖液；
7，計算10µl內(nèi)的蟲數(shù)，一式三份，計算平均值；
8，準(zhǔn)備懸浮液，得到[25蟲/10µl]；
9，將10µl蠕蟲溶液轉(zhuǎn)移到35mm板上，等到水滴被吸收。
10，5分鐘后，在5分鐘內(nèi)使用WMicrotracker SMART注冊蠕蟲活動。在獲取之前，通過對平板進行機械刺激來刺激蠕蟲。

微孔板準(zhǔn)備：

按照標(biāo)準(zhǔn)程序制備NGM；
在加入鹽和膽固醇后立即將左旋咪唑加入55°C的NGM瓊脂溶液中；
左旋咪唑板未接種OP50；
測定是在實驗開始前已將模板降到室溫的板上進行的；
在將蠕蟲添加到每個板之前，在每個板的邊緣做一個100mm硫酸銅環(huán)，以防止蠕蟲爬出瓊脂；
當(dāng)添加蠕蟲時，要小心不要刮傷瓊脂-蠕蟲往往會爬進瓊脂表面的任何裂縫；

在本實驗中，我們觀察了左旋咪唑處理在NGM培養(yǎng)基中培養(yǎng)的秀麗隱桿線蟲群體中的動力學(xué)效應(yīng)。

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