西歸對小鼠學習記憶功能的影響

摘要：目的研究西歸對小鼠學習記憶功能的影響。方法采用跳臺法、避暗法觀察西歸對東莨菪堿、亞硝酸鈉、乙醇所致小鼠學習記憶功能障礙的影響。結果與模型組及溶劑組比較，西歸能明顯延長東莨菪堿、亞硝酸鈉、乙醇所致學習記憶障礙小鼠的潛伏期（戶＜０.０５或戶＜０.０１），并能降低錯誤次數（戶＜０.０５或／＞＜０.０１）。結論西歸具有改善小鼠學習記憶障礙作用。��

關鍵詞：西歸；小鼠；學習記憶

西歸為傘形科屬植物西藏凹乳芹（設／Ａ／ＭＷｅＢｏｂｓ．）的根，又稱獨腳當歸，其主要分布在中國的西部。在民間已有百余年的使用歷史，云南大理有人工栽培，當地人用其作為滋補蔬菜食用，鮮品也可生吃，風味獨特。西歸氣芳香，味甘、微苦；具有補血、補氣、調經等功效現代藥理學研究表明，西歸具有抗疲勞、抗缺氧、抗氧化等作用。但關于西歸對學習記憶功能障礙的研究，目前尚未有報道。本文將通過研究西歸對多種化學藥物所致學習記憶障礙的影響，為下一步開發研究西歸奠定理論基礎。

１材料與儀器

１．１材料

西歸，購于云南省大理州鶴慶縣馬廠鄉，經大理學院藥學院生藥教研室馬曉匡教授鑒定為傘形科植物西藏凹乳芹的根；人參皂苷（ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ，�牐牵樱牐�，惠州市東方植物保健科技有限公司，批號：２００７０５１６；羧甲基纖維素鈉（ＣＭＣ－Ｎａ），淮南山河藥用輔料有限公司，批號０３０６０３；�牐梗担ヒ掖�，購于大理博源化工；無水乙醇，天津市化學試劑一廠，批號：０６０８２４；氫溴酸東莨菪堿，上海禾豐制藥有限公司，批號：２００５０５１８；亞硝酸鈉，重慶化學試劑總廠，批號：９７０９２３。

１．２儀器

ＲＥ５２－０５旋轉蒸發儀，上海亞榮生化儀器廠；XR-3TB跳臺測試系統，上海欣軟信息科技有限公司；XR-XB110避暗系統，上海欣軟信息科技有限公司。

２動物

ＫＭ種小鼠，雌雄各半，體重１８￣２２ｇ，由四川省科學院省人民醫院實驗動物研究所提供，許可證號：ＳＣＸＫ（川）２００４－１５。

３方法

３．１西歸的提取及溶液的制備

３．１．１提取取干生藥西歸粗粉１０�牐埃埃埃�００ｇ，用９５％乙醇回流４次，然后合并濾液，經減壓濃縮，最終得浸裔１７９８．２６ｇ，提取效率為１７．９８％，即１ｇ浸膏相當于５．５６ｇ的生藥。

３．１．２ １％ＣＭＣ－Ｎａ的制備取適量的ＣＭＣ－Ｎａ，用純凈水配制到所需濃度。

３．１．３西歸溶液的制備１２１根據小鼠對西歸的最大給藥量為４０４．４�牐缟�藥．ｋｇ＿、ｄ＿、西歸高劑量、西歸中劑量、西歸低劑量分別為最大給藥量的１／５、１／１０、１／２０，即給藥劑量分別為８０．８８�牐�.ｋｇ—１、４０．４４�牐�.ｋｇ＇�牐玻埃�２２�牐�.ｋｇ—１。以０．２�牐恚�.（１０ｇ廣灌胃給藥，應分別配制成７２．８％、３６．４％、１８．２％的西歸溶液。

３．１．４�牐保ィ牐牵又苽湟裕牵咏o藥劑量２００�牐恚�.ｋｇ＿１，給藥體積０．２�牐恚�.（ｌＯｇＴ１，即應配制１％的ＧＳ溶液。�。保�００�牐绲模牵樱�用純凈水配制到所需濃度。

３．１５�牐保玻�亞硝雜制備以亞硝麵給藥劑量１２０�牐恚纾��牐耄纾Ыo藥容量０．１�牐恚蹋��牐ǎ保埃牐纾�＇即應配制１．２％的亞硝酸鈉溶液。�。保�２０�牐绲膩喯跛徕c，用純凈水配制到所需濃度。

３．１．６�牐矗埃ヒ掖贾苽淙�無水乙醇２０�牐恚�，用純凈水稀釋到所需濃度。

３．２西歸對乙醇所致記憶再現陣碎的彩響

３．２．１跳臺法�。耍头N小鼠８４只，雌雄各半，隨機分成７組，分別為正常組、模型組、溶劑組、西歸高劑量組、西歸中劑量組、西歸低劑量組及人參皂苷組，各組每天灌胃１次，連續給藥６�牐�，其中正常組、模型組分別給予等體積的生理鹽水，溶劑組給予等體積的溶劑。于末次給藥后１�牐�，先讓小鼠在跳臺儀中適應３�牐恚椋睿�然后在電流0.4mA下訓練５�牐恚椋�。于訓練后２４�牐瑁牐ㄔ跍y試前１�牐�，再給１次藥）。正常組給予等體積的生理鹽水，其余各組均灌胃４０％乙醇０．１�牐恚蹋牐撸牐ǎ保埃牐纾�＇�牐常埃牐恚椋詈鬁y試（開始測試時，將小鼠放在平臺上），記錄小鼠在５ｍｉｎ內的潛伏期及錯誤次數。

３．２＿２避暗法取ＫＭ種小鼠７７只，動物分組、給藥時間、給藥方法及給藥劑量均同跳臺法，于末次給藥后１�牐�，開始訓練（先讓小鼠適應環境３�牐恚椋�，然后在0.4mA的電流下訓練５�牐恚椋睿牐�。于訓練后２４�牐瑁ㄔ跍y試前１�牐�，再給１次藥），正常組給予等體積的生理鹽水，其余各組灌胃４０％乙醇Ｏ．ｌｍＬ.（１０�牐纾�＇�牐常埃恚椋詈鬁y試（把動物放人明室，背朝洞口），記錄小鼠在５ｍｉｎ內的潛伏期及錯誤次數。

３．３西歸對東茛菪減所致記憶獲得陣碎的影響

３．３．１跳臺法�。耍头N小鼠８４只，雌雄各半，隨機分成７組，分別為正常組、模型組、溶劑組、西歸高劑量組、西歸中劑量組、西歸低劑量組及人參皂苷組，各組每天灌胃一次，連續給藥６�牐�，其中正常組、模型組分別給予等體積的生理鹽水，溶劑組給予等體積的溶劑。于末次給藥后４５�牐恚椋�，西歸各組及模型組小鼠腹腔注射２�牐恚�.ｋｇ—１氫溴酸東莨菪堿，正常組腹腔注射等體積生理鹽水，１５�牐恚椋詈箝_始訓練（先讓小鼠在跳臺儀中適應３�牐恚椋睿�然后在電流0.4mA下訓練５�牐恚椋睿牐�。２４�牐韬箝_始測試（于測試前１�牐瑁�再給１次藥），開始測試時，把小鼠放在平臺上，并記錄小鼠在電流0.4mA下５�牐恚椋顑鹊臐摲�期及錯誤次數。

３．３．２避暗法�。耍头N小鼠７７只，動物分組、給藥時間、給藥方法及給藥劑量均同跳臺法，于末次給藥后４５�牐恚椋�，西歸各組及模型組腹腔注射２�牐恚�.ｋｇ－１氫溴酸東莨菪堿，正常組腹腔注射等體積生理鹽水，１５�牐恚椋詈箝_始訓練（把�嵭∈蠓湃吮馨祪x適應環境３�牐恚椋�，然后在電流0.4mA下訓練５ｍｉｎ�牐�。２４�牐韬箝_始測試（于測試前１�牐瑁�再給１次藥），開始測試時，把動物放人明室，背朝洞口，并記錄小鼠在電流0.4mA下５ｍｉｎ內的潛伏期及錯誤次數。

３．４西歸對亞硝狻鈉所致記憶鞏固障碎的影響

３．４．１跳臺法�。耍头N小鼠８４只，雌雄各半，隨機分成７組，分別為正常組、模型組、溶劑組、西歸高劑量組、西歸中劑量組、西歸低劑量組及人參阜苷組，各組每天灌冑１次，連續給藥６�牐�，其中正常組、模型組分別給予等體積的生理鹽水，溶劑組給予等體積的溶劑。于末次給藥后１�牐�，開始訓練（先讓小鼠在跳臺儀中適應３�牐恚椋�，然后在電流0.4mA下訓練５ｍｉｎ）。訓練后，西歸各組及模型組立即皮下注射１２０�牐恚�.ｋｇ＿ｌ亞硝酸鈉，正常組皮下注射等體積的生理鹽水，２４�牐韬箝_始測試（于測試前１ｈ，再給１次藥），開始測試時，把小鼠放在平臺上，并記錄小鼠在電流0.4mA下５�牐恚椋顑鹊臐摲�期及錯誤次數。

３．４．２避暗法�。耍头N小鼠７７只，動物分組、給藥時間、給藥方法及給藥劑量均同跳臺法，于末次給藥后１�牐瑁�開始訓練（把小鼠放入避暗儀適應環境３�牐恚椋�，然后在電流0.4mA下訓練５ｍｉｎ�牐�。訓練后，給藥組及模型組立即皮下注射１２０�牐恚�.ｋｇ－１亞硝酸鈉，正常組皮下注射等體積的生理鹽水。２４�牐韬箝_始測試（于測試前１�牐瑁�再給１次藥），開始測試時，把動物放人明室，背朝洞口，并記錄小鼠在電流0.4mA下５ｍｉｎ內的潛伏期及錯誤次數。

３．５統計方法

采用ＳＰＳＳ�牐保常�０軟件包中方差分析ＬＳＤ法統計分析潛伏期，用Ｇａｍｅｓ－Ｈｏｗｅｌｌ法統計分析錯誤次數。

４討論

學習記憶是構成大腦最高機能一智能的要素，在智能發展過程中起決定性作用。學習是指新行為（經驗）的獲得和發展，記憶則是通過學習獲得經驗的保持和再現。學習記憶是一個非常復雜的神經活動過程，它與腦內神經遞質（主要是乙酰膽堿）、腎上腺素、５－羥色胺及氧等物質密切相關，而這些物質腦內缺乏可引起學習記憶獲得、鞏固及再現障礙。目前，由東莨菪堿、亞硝酸納和乙醇所致學習記憶獲得、鞏固及再現障礙是公認的學習記障礙工具藥物。

近年來，西歸的藥理學研究表明，西歸具有抗疲勞、抗缺氧的作用�牎６�抗疲勞、抗缺氧可促進學習記憶的作用因此，認為西歸可能具有促進學習記憶的作用。通過跳臺、避暗兩種實驗方法，研究西歸對東莨菪堿、亞硝酸鈉和乙醇所致小鼠學習記憶獲得、鞏固及再現障礙的影響。實驗結果顯示，西歸能明顯提高東茛菪堿、亞硝酸納、乙醇所致學習記憶障礙小鼠的潛伏期，并能降低錯誤次數，說明西歸具有改善學習記憶的作用。其作用機制可能與促進了中樞膽堿能神經系統活動、抗腦缺血缺氧等有關。但學習記憶是一個復雜的生理過程，因此要具體的了解西歸促進學習記憶作用機制，還有待于進—步研究。