新發和再發傳染病對公共衛生造成了嚴重影響。然而，由于這些病原體例如新冠COVID-19，SARS必須在3或4級別生物安全實驗室中進行處理，因此抗病毒藥或疫苗的研發常常受到阻礙。人們一直在積極尋求解決這一問題的替代方法，其中使用假病毒代替野生型病毒，是一種很好的手段。
 

假病毒是一種重組病毒顆粒，其核心/骨架和包膜蛋白來源于不同的病毒。假病毒內部的基因通常被改變或修飾，使得它們不能自行產生表面蛋白。假病毒能夠感染易感細胞，但是它們僅在感染的宿主細胞中復制1輪。與野生型（WT）病毒相比，假病毒可以在2級的生物安全處理級別的實驗室進行處理，更易于操作。假病毒被廣泛用于細胞病毒感染機制，受體識別研究，以及疫苗開發和評估中和抗體等。
 

由于假病毒通常經過工程改造以攜帶報告基因，因此對這些病毒進行定量分析比對WT病毒容易得多。在研究假病毒時通常使用qPCR檢測構建的假病毒的病毒滴度，使用Western blot鑒定假病毒是否表達等。
 

例如由北京大學健康科學中心微生物與傳染病中心，在《Plos One》發表的《Development and Evaluation of a Pseudovirus-Luciferase Assay for Rapid and Quantitative Detection of Neutralizing Antibodies against Enterovirus 71》的文章中使用qPCR的方法對構建的假病毒滴度進行檢測，qPCR方法可以更加準確地測定病毒滴度和病毒感染效率。更精準的定量可以選擇Naica微滴芯片數字PCR系統。
 

由軍事醫學科學院軍事獸醫研究所和河南科技學院動物科學與獸醫學院在《JVS》上發表的《Packaging of Rift Valley fever virus pseudoviruses and establishment of a neutralization assay method》的文章中，使用Western blot方法對構建的假病毒進行鑒定，實驗顯示兩個特異性條帶，分子量約為65 kDa和56 kDa，分別與RVFV G1和G2蛋白的大小一致。陰性對照組未見特異性條帶。這些結果表明，目的蛋白的表達是正確的。western blot檢測結果均表明所得到的RVFV假病毒含有RVFV G1和G2蛋白，證實了假病毒的成功構建。
 

Azure IRIS^TM實時熒光定量PCR系統來自于美國Azure Biosystems公司，融合了高品質PCR溫度模塊和卓越的熒光檢測系統，為您的科學研究提供高精準、高靈敏可靠結果。
 

產品特性：

◐ 數據可靠性——連續1000次實驗，結果高度一致。

◐ 應用靈活性——提供多種qPCR應用分析。

◐ 流程智能化——觸控屏和直觀用戶界面，操作簡單，可多機聯用。

◐ 在線便捷性——主機可獨立運行qPCR程序，數據可USB、Wi-Fi等網絡傳輸。
 

連續運行1000輪qPCR實驗（GAPDH定量）Cq值。

在Azure IRIS上，連續運行1000輪qPCR實驗（GAPDH定量），每輪96個反應，

并連續計算Cq值的平均值和Cq值的標準偏差。Cq值=22.4±0.01
 

選擇western blot檢測方法時，使您不再受限于成像系統。熒光檢測方法具備出色的定量檢測和多重檢測能力。化學發光檢測具備絕佳的靈敏度，適用于低豐度蛋白檢測；Azure Biosystems試劑開放，您可以任選方法、任選試劑獲取數據。
 

產品特性：
 

◐ 雙紅外檢測-激光光源658nm和784nm，較LED光源和白光光源靈敏度更高，信噪比更好。

◐ 同時4通道熒光成像，配合AzureRed熒光蛋白染色試劑進行全蛋白定量，更符合期刊雜志數據要求。

◐ 快速高靈敏化學發光檢測，具有多種曝光方式可供選擇，包括快速自動采集，寬動態范圍采集，低豐度樣品長時間采集，累積曝光，多重曝光等。

◐ 彩色Marker成像，分子量查看更直觀。

◐ 2min完成制冷，即插即用。

◐ 符合21 CFR Part 11。

參考文獻：

1. Yuetao Li，Yongkun Zhao etc. Packaging of Rift Valley fever virus pseudoviruses and establishment of a neutralization assay method. J Vet Sci2018, 19(2), 200-206 https://doi.org/10.4142/jvs.2018.19.2.200

2. Qianqian Li etc. Current status on the development of pseudoviruses for enveloped viruses. Rev Med Virol.2017;e1963.

https://doi.org/10.1002/rmv.1963

3. Eva Chand etc .evelopment of a Moloney Murine LeukemiaVirus–Based Pseudotype Anti-HIV Assay Suitable for Accurate and RapidEvaluation of HIV Entry Inhibitors. Journal of Biomolecular Screening 11(6);2006DOI: 10.1177/1087057106288881