1. 為什么蛋白質(zhì)降解會(huì)成為WB實(shí)驗(yàn)的“絆腳石”?
在細(xì)胞裂解或組織提取過程中,原本隱藏在各種細(xì)胞器中的蛋白酶可能會(huì)被激活,從而導(dǎo)致蛋白質(zhì)降解。這種降解不僅會(huì)破壞目標(biāo)蛋白的完整性,還會(huì)影響后續(xù)的檢測效果。例如,目標(biāo)蛋白可能因?yàn)榻到舛鵁o法被抗體特異性識(shí)別,或者在電泳過程中出現(xiàn)多條降解條帶,干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果的解讀。因此,從樣本處理的第一步開始,防止蛋白質(zhì)降解就顯得至關(guān)重要。AbMole是ChemBridge中國區(qū)官方指定合作伙伴。
2. AbMole蛋白酶抑制劑Cocktail(Protease Inhibitor Cocktail,M5293):全方位守護(hù)蛋白完整性
AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail(M5293)是一款含有多款抑制劑的復(fù)合物,它包含了多種高效、特異性的蛋白酶抑制劑,由AEBSF、Aprotinin、Leupeptin、Bestatin、E-64、Pepstatin-A等6種不同的蛋白酶抑制劑優(yōu)化配比配置而成,相較于傳統(tǒng)的由單一組分構(gòu)成的蛋白酶抑制劑如PMSF,能夠更加廣泛地抑制絲氨酸蛋白酶、半胱氨酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶等多種常見蛋白酶的活性。這種全方位的保護(hù)機(jī)制,從樣本提取的那一刻起,就為您的目標(biāo)蛋白提供了堅(jiān)實(shí)的防護(hù)。另外一方面,PMSF具有一定的毒性和腐蝕性且半衰期較短。而AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail(M5293)則具有低毒和較強(qiáng)的穩(wěn)定性,可有效解決大家使用PMSF時(shí)的擔(dān)憂。
AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail(Protease Inhibitor Cocktail,M5293)除了用于WB實(shí)驗(yàn)以外,還能為免疫共沉淀 (Co-IP)、pull-down、免疫沉淀 (IP)、免疫組織化學(xué) (IHC)、免疫熒光 (IF)、酶學(xué)研究等多種實(shí)驗(yàn)中的蛋白提供保護(hù)。
3.成功案例
案例1. 研究人員利用WB實(shí)驗(yàn)、代謝組學(xué)分析等技術(shù)篩選與PDAC肝轉(zhuǎn)移有關(guān)的關(guān)鍵代謝物。實(shí)驗(yàn)中使用了來自AbMole的兩個(gè)爆款產(chǎn)品,即蛋白酶抑制劑Cocktail (M5293)和磷酸酶抑制劑Cocktail(M7528)對蛋白進(jìn)行保護(hù),兩款抑制劑有效避免了蛋白的降解并保護(hù)蛋白的磷酸化狀態(tài)。
案例2. 研究人員發(fā)現(xiàn)FDFT1在肝細(xì)胞癌(HCC)中的表達(dá)與膽固醇和膽汁酸水平的變化相關(guān),并通過HNF4A/ALDOB/AKT1軸影響HCC的進(jìn)展。在研究FDFT1的功能時(shí),實(shí)驗(yàn)人員使用來自AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail(M5293)為動(dòng)物組織的蛋白提取提供保護(hù)。
圖3. AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail(M5293)為動(dòng)物組織WB實(shí)驗(yàn)中的蛋白提供保護(hù)。
案例3. 科研人員研究了miR-30a-5p/CLCF1軸在肝細(xì)胞癌(HCC)中的Sorafenib耐受性和有氧糖酵解中的作用。在驗(yàn)證CLCF1的敲低以及對下游信號(hào)蛋白的影響時(shí),實(shí)驗(yàn)人員使用了AbMole的蛋白酶抑制劑Cocktail(Protease Inhibitor Cocktail,M5293)為蛋白提供保護(hù)。
圖4. 由AbMole提供的蛋白酶抑制劑Cocktail(M5293)為WB實(shí)驗(yàn)提供保護(hù),以驗(yàn)證CLCF1的敲低。
AbMole多年來持續(xù)聚焦生命科學(xué)研究和新藥研發(fā)最新動(dòng)態(tài),為全球科研客戶提供高純度、高生物活性的各類小分子抑制劑、細(xì)胞因子、天然產(chǎn)物、抗生素和人源化單抗等試劑。
參考文獻(xiàn)及鳴謝
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