細胞分化軟骨細胞阿爾新藍（alcian blue）染色試劑盒產品說明書（中文版）

主要用途

YIJI細胞分化軟骨細胞阿爾新藍（alcian blue）染色試劑是一種旨在使用陽離子染料阿爾新藍，使軟骨組織上蛋白多糖聚糖染色，呈現深藍色，來分析固定處理的細胞樣本中軟骨生成狀況的權威而經典的技術方法。該技術經過精心改良傳統方法、成功實驗證明的。主要適用于動物細胞分化和軟骨生成的檢測。廣泛用于軟骨細胞或組織病理生理的研究。產品嚴格無菌，即到即用，操作簡捷，性能穩定，顯色清晰。

技術背景

間質干細胞（mesenchymal stem cell）分化產生脂肪細胞（adipocyte）、成骨細胞（osteoblast）、肌細胞（myocyte和軟骨細胞（chondrocyte）。軟骨細胞及其細胞外基質（extracellular matrix）構成軟骨組織（cartilage tissue），其含有硫酸軟骨素（chondroitin sulfate）和硫酸角質素（karatan sulfate）等為主要成分的蛋白多糖（proteoglycan）聚糖（aggrecan），成為軟骨生成（chondrogenesis）的標記（indicator）。阿爾新藍（alcian blue）是一種陽離子含銅染料，使酸性粘多糖（mucopolysaccharide）類蛋白聚糖染色，呈現深藍色。 

產品內容

YIJI清理液（Reagent A）  毫升

YIJI固著液（Reagent B）  毫升

YIJI染色液（Reagent C）  毫升

YIJI去色液（Reagent D）  毫升

產品說明書  1份

保存方式

保存在4℃冰箱里；YIJI染色液（Reagent C），避免光照；YIJI去色液（Reagent D）具有腐蝕性，注意操作安全；有效保證6月

用戶自備

核固紅復染試劑盒（YIJI40011）：用于常規染色后復染

小型染色缸：用于細胞染色操作

光學顯微鏡：用于細胞染色后觀察分析

實驗步驟

操作一：細胞載玻片染色

• 樣本固著處理
• 取出待測的細胞載玻片 
• 小心加上xx微升YIJI清理液（Reagent A）在載玻片上，鋪滿整個樣品表面
• 小心移去載玻片上的YIJI清理液（Reagent A）
• 小心加上xx微升YIJI固著液（Reagent B），鋪滿整個樣品表面
• 室溫下，孵育60分鐘
• 小心移去載玻片上的YIJI固著液（Reagent B）
• 小心加上xx微升YIJI清理液（Reagent A），清洗樣品表面
• 小心移去載玻片上的YIJI清理液（Reagent A）
• 重復實驗步驟7至8一次

二、樣本染色處理

• 小心加上xx微升YIJI染色液（Reagent C），鋪滿整個載玻片樣品表面
• 室溫下，孵育60分鐘，避免光照
• 小心移去載玻片上的YIJI染色液（Reagent C）
• 室溫下，小心將載玻片置入xx毫升YIJI清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
• 小心移去載玻片上的YIJI清理液（Reagent A）

三、 （選擇步驟）樣本復染處理

• 小心加上xx微升YIJI去色液（Reagent D）在載玻片上，鋪滿整個載玻片樣品表面
• 室溫下孵育3分鐘（注意：觀察背景藍色變化，避免過度褪色）
• 小心移去載玻片上的YIJI去色液（Reagent D）
• 室溫下，小心將載玻片置入xx毫升YIJI清理液（Reagent A）中孵育2分鐘
• 小心移去載玻片上的YIJI清理液（Reagent A）
• 樣本復染處理（核固紅）
• 放上蓋玻片或封片
• 即刻在一般光學顯微鏡下觀察：陽性細胞呈現深藍色，背景呈現淺藍色調（如果復染：細胞質呈現粉紅色，細胞核呈現紅色）

操作二：24孔細胞培養板染色

一、樣本固著處理

1．小心抽去24孔細胞培養板里的培養液

2．每孔加入xx微升YIJI清理液（Reagent A），清洗生長中的細胞表面

3．小心抽去每孔里的YIJI清理液（Reagent A）

4．每孔加入xx微升YIJI固定液（Reagent B），覆蓋整個生長表面

5．在室溫下孵育60分鐘

6．小心抽去YIJI固定液（Reagent B）

7．每孔加入xx微升YIJI清理液（Reagent A），清洗細胞表面

8．小心抽去YIJI清理液（Reagent A）

9．重復實驗步驟7至8兩次

二、樣本染色處理

• 小心加上xx微升YIJI染色液（Reagent C），覆蓋整個生長表面
• 室溫下，孵育60分鐘，避免光照
• 小心抽去YIJI染色液（Reagent C）
• 小心加入xx微升YIJI清理液（Reagent A）
• 室溫下孵育2分鐘
• 小心抽去YIJI清理液（Reagent A）

三、 （選擇步驟）樣本復染處理

• 小心加上xx微升YIJI去色液（Reagent D），覆蓋整個生長表面
• 室溫下孵育3分鐘（注意：觀察背景藍色變化，避免過度褪色）
• 小心抽去YIJI去色液（Reagent D）
• 小心加入xx微升YIJI清理液（Reagent A）
• 室溫下孵育2分鐘
• 小心抽去YIJI清理液（Reagent A）
• 樣本復染處理（核固紅）
• 即刻在一般光學顯微鏡下觀察：性細胞呈現深藍色，背景呈現淺藍色調（如果復染：細胞質呈現粉紅色，細胞核呈現紅色）

注意事項

• 本產品為50次操作
• 操作時，須帶手套
• YIJI去色液（Reagent D）具有腐蝕性，注意操作安全
• 所有操作在室溫下進行
• 試劑溶液在樣品表面時，避免有氣泡存在，同時確保鋪滿樣品表面
• 樣品去色避免過度
• 建議使用YIJI核固紅復染試劑盒（YIJI40011），增強染色對比度
• 細胞染色完成后，即刻進行光學顯微鏡觀察 
• 本公司提供系列軟骨組織細胞染色試劑產品

質量標準

• 本產品經鑒定性能穩定
• 本產品經鑒定顯色清晰