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EB染色液說明書

瀏覽次數(shù):14352 發(fā)布日期:2018-8-23  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

EB染色液是EB的水溶液,濃度為10mg/ml。EB(溴化乙錠)能與核酸分子特異結(jié)合,用于觀察瓊脂糖或聚丙烯酰胺凝膠中DNA或RNA分子。廣泛應(yīng)用于核酸電泳前后的染色以及流式細(xì)胞儀的樣品染色處理等。溴化乙錠(Ethidium Bromide;C21H20N3Br;分子量為394.32)含有一個(gè)可以嵌入DNA 堿基的三環(huán)平面基團(tuán)。它與DNA 的結(jié)合沒有堿基序列特異性。大約每2.5 個(gè)堿基插入一個(gè)溴化乙錠分子。當(dāng)染料分子插入后,紫外激發(fā)后呈現(xiàn)熒光,可以檢測(cè)到10ng 的DNA 條帶。

● 保存條件:

室溫避光保存。

● 注意事項(xiàng): 

EB有一定毒性,使用時(shí)請(qǐng)使用一次性手套操作,注意防護(hù)!

● 使用說明:

使用前,先離心快甩EB溶液至管底,以防開蓋后EB造成的污染。

 

瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色(預(yù)染法):

1. 按照所需濃度稱取瓊脂糖,加入TAE或TBE緩沖液,在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下時(shí),加入10 mg/ml EB溶液至終濃度為0.5μg/ml (如100ml凝膠加入EB量為5μl);徹底搖勻后鋪膠并插入梳子。

3. 凝固后,將梳子輕輕拔出。

4. 上樣電泳,電泳結(jié)束后紫外觀察。

 

瓊脂糖電泳凝膠的制備及染色(后染法):

1. 按照所需濃度稱取瓊脂糖,加入TAE或TBE緩沖液,在微波爐中加熱至徹底溶解。

2. 等凝膠溫度降至大約50-60℃以下時(shí),不要加入EB溶液,直接鋪膠并插入梳子。

3. 凝固后,將梳子輕輕拔出。

4. 上樣電泳。

5. 電泳結(jié)束后將凝膠浸泡在含有EB的TAE或TBE染色液中(染色液配制:100ml 緩沖液中加入150-200 μl EB溶液,混勻)染色15-20分鐘;TAE或TBE緩沖液中脫色10-15分鐘。

6. 紫外觀察結(jié)果。

發(fā)布者:上海一基實(shí)業(yè)有限公司一部
聯(lián)系電話:021-60548335
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