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​大鼠ELISA試劑盒通用操作說(shuō)明

瀏覽次數(shù):3528 發(fā)布日期:2019-7-16  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
大鼠ELISA試劑盒操作說(shuō)明 
每一次提醒你總能默默地記住,每一項(xiàng)任務(wù)你都會(huì)靜靜地完成,對(duì)自己及時(shí)反省讓你慢慢地進(jìn)步,望你帶著這些好的品質(zhì)去新的天地開(kāi)拓,一定會(huì)有豐厚的收獲。小編為大家介紹 大鼠ELISA試劑盒操作說(shuō)明 。
操作步驟:
 
1.   標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在第一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在第一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從第一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為24ng/L,16ng/L ,8ng/L,4ng/L, 2ng/L)。
 
2.   加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
 
3.   溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
 
4.   配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
 
5.   洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
 
6.   加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
 
7.   溫育:操作同3。
 
8.   洗滌:操作同5。
 
9.   顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
 
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
 
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
發(fā)布者:上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
聯(lián)系電話:021-52960952
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