同學(xué)們有木有經(jīng)歷過(guò)小鼠繁殖了好幾代目標(biāo)小鼠的數(shù)量卻一直達(dá)不到實(shí)驗(yàn)需求的情況？遇沒遇到過(guò)實(shí)驗(yàn)室某個(gè)傳了許多代的小鼠種群數(shù)量卻越來(lái)越少，最后只有一只獨(dú)苗的情況？

碰到這種自然繁育難題的時(shí)候，IVF(In vitro fertilization)技術(shù)就成為獲得更多小鼠和穩(wěn)定種群的最佳方式。所謂IVF就是將雌雄配子在體外受精并植入假孕母鼠體內(nèi)獲得子代小鼠的技術(shù)。

技術(shù)優(yōu)勢(shì)

通常的自然繁育方式是自然合籠，與自然合籠繁殖相比，IVF具有以下幾個(gè)優(yōu)勢(shì)：

其實(shí)IVF對(duì)自然合籠的優(yōu)勢(shì)，我們從二者的繁育方案也能窺見一斑。以2對(duì)雜合子起始擴(kuò)繁16對(duì)雜合子為例：

IVF方案

自然合籠方案

我們可以看到，通過(guò)IVF的繁殖方式，經(jīng)過(guò)一輪繁殖只需要2對(duì)雜合雄鼠就可以得到目的數(shù)量的子代；而對(duì)比自然合籠方法，同樣兩只突變雄鼠，繁殖時(shí)間多了將近半年。因此，IVF 作為一種優(yōu)秀的代養(yǎng)繁殖手段應(yīng)用在多種繁殖項(xiàng)目中。

操作流程

說(shuō)過(guò)了IVF的優(yōu)勢(shì)，我們?cè)俸?jiǎn)單和大家聊聊IVF的操作流程。

IVF操作具體分四步：

體外受精用培養(yǎng)皿準(zhǔn)備

實(shí)驗(yàn)開始前一天在35 mm培養(yǎng)皿中加入2個(gè)200 μL TYH培養(yǎng)基液滴

精子的采集

(1) 將符合要求的性成熟（8周以上）的雄鼠頸椎脫臼處死，取出附睪上體尾部，去除脂肪與血跡后，置于一個(gè)TYH液滴內(nèi)。

(2) 利用眼科剪在液滴內(nèi)橫斷附睪尾，當(dāng)精子充分游離出附睪尾后，將組織從液滴內(nèi)取出，將培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱。

圖1. 雄鼠取精操作

卵母細(xì)胞的收集

處死超排后的雌鼠，取出兩側(cè)的輸卵管，置入培養(yǎng)皿取出卵丘細(xì)胞團(tuán)放入200 μL TYH培養(yǎng)基。

精卵混合

用10 μL移液器從精子滴吸取獲能后的精子，加到卵子液滴中，根據(jù)卵團(tuán)大小情況以及精子的活力每滴加8 μL左右的精子。將精卵混合后，把培養(yǎng)皿置于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

體外受精完成后將胚胎移入假孕母鼠子宮，21天后小鼠就會(huì)出生了。

圖2. 胚胎移植操作

今天的小鼠IVF的知識(shí)就跟大家聊到這里啦。百奧賽圖依托海門動(dòng)物中心，致力于為您提供更好的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物繁育服務(wù)，每年還會(huì)舉辦小鼠飼養(yǎng)、繁育培訓(xùn)，手把手帶大家學(xué)習(xí)IVF、精子冷凍和胚胎移植等小鼠繁育技術(shù)，請(qǐng)大家多多關(guān)注哦。
 

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