檢測細胞增殖需要使用的儀器與試劑清單
許多小伙伴不知道自己檢測細胞增殖的時候究竟該檢測什么？使用哪些試劑？今天，百螢將總結的可以測量細胞增殖的方法、試劑、適用儀器等分享給大家。
細胞增殖可以通過測量諸如新合成的DNA、總核酸含量或細胞分裂等參數(shù)來確定（見表1）。 最簡單的方法是使用可與胺反應的細胞跟蹤指示劑（例如CytoTell 染料）監(jiān)視細胞分裂，這些可滲透細胞的指示劑與細胞質蛋白共價結合。由于這種共價偶聯(lián)反應，CytoTell 染料無法轉移到相鄰細胞中，并且可以在細胞中保留好幾代（最多可以觀察到9代）。隨著細胞分裂，CytoTell 染料在子細胞之間均等分布，并且每一代新細胞的熒光強度均是其親本的一半。可以使用標準的含甲醛固定劑和基于皂苷的透化緩沖液對用CytoTell 染料標記的細胞進行固定和透化，以進行進一步的細胞內分析。
表1.用于檢測細胞增殖的試劑和檢測列表。
| 檢測類型 | 原理 | 試劑/測定 | 儀器 |
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檢測細胞分裂 |
使用與細胞質蛋白結合的可滲透細胞的染料。（隨著細胞分裂，染料被轉移到子細胞。新一代細胞的熒光強度是其親本的一半。） |
熒光酶標儀，熒光顯微鏡或流式細胞儀 |
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檢測新合成的DNA |
在細胞周期的S期將修飾的核苷酸摻入新合成的DNA中。一旦摻入，這些核苷類似物就可以用作細胞周期和增殖標記物，可以使用標記的探針進行檢測以鑒定增殖細胞。 |
Bucculite dT摻入細胞增殖熒光成像試劑盒 |
熒光顯微鏡 |
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BrdU （需要酶或熒光團標記的抗BrdU抗體） |
可適用于比色，熒光或化學發(fā)光儀器 |
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檢測總核酸含量 |
使用可滲透細胞的核酸染色劑，該試劑能展現(xiàn)出與DNA質量成比例的發(fā)射信號。然后對染色的群體進行流式細胞術分析，以生成DNA直方圖，觀察細胞周期每個階段中細胞的百分比。 |
流式細胞儀 |
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