生物制藥過程中非常關(guān)鍵的一步是找到一個好的克隆， 通常它是從我們構(gòu)建完成的細胞池里通過MTX或MSX壓力的篩選獲得我們所希望的高表達，質(zhì)量符合要求的單克隆株，這是一個相當需要技術(shù)、經(jīng)驗、人力和時間過程。
 

▲圖一：傳統(tǒng)細胞株開發(fā)流程
 
CHOZN®-GS平臺
 
它通過提供先進的平臺技術(shù)助力生物制藥工藝開發(fā)，該平臺包括CHOZN®-GS細胞株，該細胞株是通過ZFNs(鋅指核酸酶)技術(shù)敲除了谷氨酰胺合成酶基因，使得細胞株的存活依賴于外源谷氨酰胺的補充。該特性可以被視為強有力的篩選原理，使得整個篩選過程無需通過加MTX或MSX壓力便可獲得高表達的目的克隆。
 
操作簡單、節(jié)約人力、時間成本。同時該平臺還包括相應(yīng)的培養(yǎng)基，具有指導意義的數(shù)據(jù)以及詳細的操作手冊，幫助操作者簡單快速的獲得目的克隆并放大到一定規(guī)模。
 

▲圖二：CHOZN^®-GS細胞株開發(fā)流程
 
 
同時默克還提供另一種助力快速獲得高表達單克隆技術(shù)---UCOE®
 
UCOE®是一種普適性染色質(zhì)開發(fā)組件——它們是天然DNA序列與管家基因的啟動子區(qū)域有關(guān)。他們被證實能夠減少甲基化，保持開放的染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，允許高穩(wěn)定的表達。
 
UCOE®技術(shù)是可以用來做任何位點的一個所謂的“好位點”。
 

▲圖三：UCOE^®基因及質(zhì)粒
 
我們在96孔板中通過數(shù)百組的Mini-pool評估了UCOE®所帶來的益處，可以很明顯的看出采用UCOE®質(zhì)粒能大大的提高高表達克隆的形成率，進而能夠很大程度上節(jié)約我們獲得高表達克隆的時間。
 

▲圖四：Non-UCOE^®與UCOE^®對高表達克隆率的影響
 

▲圖五：CHOZN^®-GS結(jié)合UCOE^®克隆生長及產(chǎn)物表達 
 

▲圖六：CHOZN^®-GS結(jié)合UCOE^®克隆3L反應(yīng)器驗證
 
通過以上的實驗和數(shù)據(jù)，我們可以看到UCOE®技術(shù)提高了穩(wěn)定高產(chǎn)克隆的產(chǎn)生率，可減少用于細胞系開發(fā)所需的時間和資源，平臺化的流程可以加快規(guī)模放大和工藝開發(fā)路徑。
 
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