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醛縮酶的特性及測定方法

瀏覽次數:1303 發布日期:2023-2-13  來源:惠誠
醛縮酶是裂解酶的一種,狹義的指催化裂解1.6-二磷酸-D-果糖生成3-磷酸-D-甘油醛與α-二羥丙酮磷酸反應的酶(同時在糖異生中也可催化這個反應的逆反應),即指1.6-二磷酸-D-果糖醛縮酶(Ec 4.1.2.13)。(廣義的指催化同形式反應的酶,例如亦有將鼠李糖磷酸醛縮酶等統稱為醛縮酶)。

一、概況
1、反應式
測定溫度為30℃,最適pH為7.0。
2.米氏常數
3.專一性
酵母醛縮酶對果糖-1,6-二磷酸具有高度的專一性,但是,此酶與L-山梨糖-1,6-二磷酸反應速度僅為果糖-1,6-二磷酸反應速度的30%。
4.抑制劑
醛縮酶的抑制劑有 Cu2+,Zn2+,Ag+和鄰-苯菲繞啉。
5.純度要求
所需純度最低限度為9單位/毫克,所含的D-甘油醛-3-磷酸脫氫酶與L-甘油-3-磷酸脫氫酶應分別小于0.01%與0.05%。
6.意義
醛縮酶可用來測定果糖-1,6-二磷酸。血清中醛縮酶對于肌病是一項關鍵性的診斷試驗,并且對于心肌梗塞、肝病和急性精神病等病也有用處。
7.穩定性
此酶以3.2MpH7.6的硫酸銨懸浮液保存在4℃下,其穩定期可達6個月之久。pH 值小于4.5,則使此酶發生不可逆變性。
二、測定方法
1.反應式
經Jagannathan等改進的反應式:
可在240nm處跟蹤吸光率的增量。一個單位即定為在規定的條件下溫度為25℃,每分鐘能使吸光率增量變化為1.00時所需的活性。
2.偶聯法
按反應式(5)在340nm處測量吸光率的減量,并由此可計算出酶活性。活性(以毫單位/毫升醛縮酶表示)即等于吸光率差值ΔA(10分鐘)x129(于37℃)。
發布者:上;菡\生物科技
聯系電話:18018625233
E-mail:17715331663@163.com

標簽: 醛縮酶測定
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