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限制性內(nèi)切酶實(shí)驗(yàn)的應(yīng)用和過程中的問題解答

瀏覽次數(shù):396 發(fā)布日期:2024-5-23  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

限制性內(nèi)切酶不僅在分子克隆中有著廣泛應(yīng)用,還可以應(yīng)用于疫苗研發(fā)生產(chǎn)、基因測(cè)序、SNP 鑒定、ddPCR 等領(lǐng)域。在往期的內(nèi)容中,我們已經(jīng)介紹了什么是限制性內(nèi)切酶以及內(nèi)切酶的分類,本期就來(lái)為大家盤點(diǎn)一下在使用內(nèi)切酶過程中最容易出現(xiàn)的問題以及解決方法 。

限制性內(nèi)切酶的名稱通常由其來(lái)源物種的分類決定,屬名首字母 + 種名前兩位字母 + 血清型/菌株 + 同菌株的多種限制酶流水號(hào)羅馬數(shù)字。

為了方便大家理解,咱們以 Hind III  為例:

 

▐  問題 1:酶切不完全

 

▐  問題 2:酶切后 DNA 瓊脂糖凝膠電泳呈彌散狀

▐  問題 3:膠中條帶與預(yù)期不符

  問題 4:克隆很少或沒有

▐  問題 5:假陽(yáng)性過多

 

 


限制性內(nèi)切酶在實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用非常廣泛,實(shí)驗(yàn)過程中會(huì)遇到的問題也多種多樣。有了小 M 給大家總結(jié)的各類實(shí)驗(yàn)問題及解決方案,相信大家的實(shí)驗(yàn)會(huì)更加順利~

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發(fā)布者:上海皓元生物醫(yī)藥科技有限公司
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