(一)原理

細胞培養(Cell culture)是模擬機體內生理條件，將細胞從機體中取出，在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代，進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。近年來，廣泛地應用于分子生物學、遺傳學、免疫學、腫瘤學、細胞工程等領域，發展成一種重要生物技術，并取得顯著成就。由體內直接取出組織或細胞進行培養叫原代培養。原代培養細胞離體時間短，性狀與體內相似，適用于研究。一般說來，幼稚狀態的組織和細胞，如：動物的胚胎、幼仔的臟器等更容易進行原代培養。

(二)操作

1．取材

用頸椎脫位法使乳兔迅速死亡。然后，把整個動物浸入盛有75％乙醇的燒杯中數秒鐘消毒，取出后放在大平皿中攜入超凈臺。用消過毒的剪刀剪開用碘酒和乙醇再次消毒后的皮膚，剖腹取出肝臟或腎臟。置于無菌平皿中。

2．切割

用滅菌的PBS液將取出的臟器清洗三次，然后用眼科手術剪刀仔細將組織反復剪碎，直到成1mm3左右的小塊，再用PBS清洗，洗到組織塊發白為止。移入無菌離心管中，靜置數分鐘，使組織塊自然沉淀到管底，棄去上清。

3．消化、接種培養

吸取0.25％胰蛋白酶一0.02％EDTA混合消化液1ml，加入離心管中，與組織塊混勻后，加上管口塞子，37℃水浴中消化8～10分鐘，每隔幾分鐘搖動一下試管，使組織與消化液充分接觸，靜止，吸去上清，向離心管中加入5～10ml含5％小牛血清的MEM培養基，用吸管吹打混勻，移入二個培養瓶中，置于二氧化碳培養箱中培養。

(三)結果

細胞接種后一般幾小時內就能貼壁，并開始生長，如接種的細胞密度適宜，5天到一周即可形成單層。

傳代細胞培養

(一)原理

體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代，以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞，并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后，由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭，將培養的細胞分散，從容器中取出，以1:2或l:3以上的比率轉移到另外的容器中進行培養，即為傳代培養。

細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養的一段期間，與細胞世代或倍增不同。在一代中，細胞培增3～6次。細胞傳代后，一般經過三個階段：游離期、指數增生期和停止期。

常用細胞分裂指數表示細胞增殖的旺盛程度，即細胞群的分裂相數／100個細胞。一般細胞分裂指數介于0.2％～0.5％，腫瘤細胞可達3～5％。細胞接種2～3天分裂增殖旺盛，是活力最好時期，稱指數增生期(對數生長期)，適宜進行各種試驗。

(二)操作

1．將長成單層的原代培養細胞或HeLa細胞從二氧化碳培養箱中取出，在超凈工作臺中倒掉瓶內的培養液，加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜)，靜置5～10分鐘。

2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞，如果細胞變園，相互之間不再連接成片，這時應立即

在超凈臺中將消化液倒掉，加入3～5ml新鮮培養液，吹打，制成細胞懸液。

3．將細胞懸液吸出2ml左右，加到另一個培養瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養液，蓋好瓶塞，送回二氧化碳培養箱中，繼續進行培養。

(三)結果

一般情況，傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養瓶壁上，2～4天就可在瓶內形成單層，需要再次進行傳代。

三、器材及液體的準備和無菌操作的注意事項

(一)器材和液體的準備

細胞培養用的玻璃器材，如：培養瓶、吸管等在清洗干凈以后，裝在鋁盒和鐵筒中，120℃，2小時干烤滅菌后備用；手術器材、瓶塞、配制好的PBS液用滅菌鍋15磅，20分鐘蒸氣滅菌；MEM培養液、小牛血清、消化液用G6濾器負壓抽濾后備用。

(二)無菌操作中的注意事項

在無菌操作中，一定要保持工作區的無菌清潔。為此，在操作前要認真地洗手并用75％乙醇消毒。操作前20～30分鐘起動超凈臺吹風。操作時，嚴禁說話，嚴禁用手直接拿無菌的物品，如瓶塞等，而要用器械，如止血鉗、鑷子等去拿。培養瓶要在超凈臺內才能打開瓶塞，打開之前用乙醇將瓶口消毒，打開后和加塞前瓶口都要在酒精燈上燒一下，打開瓶口后的操作全部都要在超凈臺內完成。操作完畢后，加上瓶塞，才能拿到超凈臺外。使用的吸管在從消毒的鐵筒中取出后要手拿末端，將尖端在火上燒一下，戴上膠皮乳頭，然后再去吸取液體。總之，在整個無菌操作過程中都應該在酒精燈的周圍進行。

【本平臺合作項目】

分子診斷、病理診斷、藥效學評價、毒理學實驗、細胞藥篩、動物建模、PDX模型、CRISPR/Cas9基因編輯、病理檢測、基因芯片、蛋白組學、代謝組學、高通量測序、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務！

【全國免費熱線】：400-675-6758

【電話】 023-65316016,023-65316556

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【地址】 重慶高新區生物醫藥研發產業園D棟

  公司簡介

重慶威斯騰生物醫藥科技有限責任公司（簡稱“威斯騰生物”）是重慶高圣醫藥有限責任公司參與組建，放眼于全球生物醫藥前沿技術轉化應用開發，立足于全國生物醫藥研發檢測合作及項目孵化、成果轉化，現在發展為一家集生物醫藥技術轉化、分子診斷產品開發及創新生物藥物開發的科技集團公司。威斯騰生物致力于重大疾病包括惡性腫瘤、重大傳染病等領域的早期篩查及快速檢測。公司總部設立于重慶高新區，同時在上海和北京設有管理團隊和運行機構。 
威斯騰生物擁有專家顧問團隊千人專家7人，長江學者2人，海外院士2人；現有固定研發人員100余人同時還擁有320人的海外科研顧問團隊。擁有完善的基礎實驗平臺、先進的實驗設備、專業的技術團隊、標準的操作流程、優質的合作平臺和強大的科學家網絡，可為國內外研發機構與藥企提供專業的生物研發檢測合作和科技成果轉化項目指導。七大基礎服務平臺包括：細胞生物學研究平臺、分子生物學研究平臺、病理學研究平臺、免疫學研究平臺、動物模型研究平臺、蛋白質與多肽研究平臺、測序和芯片研究平臺。此外，公司擁有四大創新研發中心：分子診斷開發平臺,CRISPR/Cas9靶向基因修飾藥物開發平臺、納米靶向載藥創新平臺、創新藥物篩選平臺，除了進行公司的研發項目外，還可為從事相關研究的團隊和企業提供個性化服務。
威斯騰生物研發中心一直致力于高端分子診斷產品的創新研發，擁有國內外處于領先地位的核心技術包括超微量核酸快速提取技術、快速熒光原位雜交（FISH）技術，CRISPR/Cas9基因定點編輯技術，熒光量子點材料開發和運用，醫學模式動物開發等。
重點研發領域包括肺癌、結直腸癌、乳腺癌等惡性腫瘤的快速早期診斷，目前已成功開發非小細胞肺癌快速FISH診斷試劑盒、乳腺癌快速FISH診斷試劑盒、超微量糞便核酸快速診斷結直腸癌試劑盒等產品，其中非小細胞肺癌快速FISH診斷試劑盒入選重慶市技術創新與應用示范專項（產業類）重點研發項目名單，獲中國生物醫藥創新創業項目最具投資價值TOP10評選賽北京站榮獲一等獎、第八屆中國創新創業大賽生物醫藥行業組重慶賽區冠軍等。
同時，公司在重大傳染病的快速檢測及診斷上進行了研發布局，包括結核、EV71手足口病等重大傳染病的快速診斷，擁有項目包括超微量尿液核酸檢測結核試劑盒、量子點熒光標記傳染病快速檢測試劑盒等。新冠病毒疫情爆發后，威斯騰生物第一時間組建“新型冠狀病毒試劑盒緊急研究小組”及“新型冠狀病毒研發物資采購小組”，自籌經費成功研發新型冠狀病毒（2019-nCoV）快速核酸檢測試劑盒（免核酸提取熒光PCR一步法）、新冠病毒糞便RNA核酸提取試劑盒。產品已提供給20家以上的疾控中心和公共衛生中心使用，并與以上第三方疾控中心/公共衛生中心建立起了長期穩定的試用關系。
威斯騰生物是國家高新技術企業、科技型企業、市級新型研發機構、專精特新企業、北京市海淀區生物醫藥與大健康協會副會長單位、重慶市醫藥行業協會副會長單位。下屬研發平臺被認定為“中關村生物醫藥共享平臺”、“中關村海淀區生物醫藥公共研發檢測平臺”、“重慶市生物醫藥檢測共享平臺”等。公司多次在全國性比賽中獲獎，2019年榮榮獲第八屆中國創新創業大賽生物醫藥行業組重慶賽區冠軍。
同時，威斯騰生物積極參與國際技術轉移、成果轉化相關合作，與美國、澳大利亞、新加坡等相關高校、研究院所建立了深厚的聯系和多元化的合作，公司堅持以“技術創新、機制創新，文化創新，管理創新，戰略創新”的理念，為重大惡性腫瘤、傳染病疾病等領域的創新研發而不懈努力。
 

  核心競爭力

• 熒光量子點材料開發和運用
• 快速熒光原位雜交（FISH）
• CRISPR/Cas9基因定點編輯技術
• 基因芯片診斷
• ChIP表觀遺傳研究
• 醫學模式動物開發

產業布局：

• 科技服務
• ctDNA,CTC液體活檢
• 病理醫學診斷
• PDX腫瘤篩查
• POCT產品開發
• IVD產品開發
• 分子醫學診斷
• 創新研發系統

  行業交流

  2015年12月 由中國醫藥企業發展促進會、中國醫藥科技成果轉化中心主辦，重慶市醫藥 產業發展辦公室指導，威斯騰生物醫藥承辦的“首屆2015·中國（重慶）生物醫藥前沿技術與產業化發展研討會”在重慶渝州賓館隆重舉行；

  2016年4月  新加坡工程院院士、美國電子工程院連勇院士到威斯騰生物醫藥交流訪問；

  2016年6月  美中藥協（SAPA）總會前會長、美國強生公司研發總監、美國藥學家協會院士戴衛國博士到威斯騰生物醫藥交流訪問；

  2016年6月  威斯騰生物醫藥受邀參加第二屆藥學進展前沿高峰論壇；

  2016年8月  威斯騰生物醫藥受邀參加2016北京生物醫藥科技成果展示暨項目推介會；

  2016年10月  威斯騰生物醫藥受邀參加“科技部科技成果直通車暨首屆科技成果路演活動”；

  2016年10月  威斯騰生物醫藥受邀參加2016中國（泰州）抗體藥物高峰論壇；

  2016年11月  威斯騰生物醫藥受邀參加中國醫藥企業發展促進會第三次會員代表大會；

  2016年11月  威斯騰生物醫藥成為諾獎醫學峰會投資委員會常務委員單位；

  2016年12月  威斯騰生物醫藥受邀參加北京市海淀區生物與健康產業協會第一屆會員大會暨2016中關村核心區生物與健康產業發展高峰論壇；

  2017年1月   威斯騰生物醫藥受邀參加首屆國際未來論壇；

  2017年1月   威斯騰生物醫藥受邀參加第二屆中國天使兩會雙創年度盛典；

  2017年3月  北京生物技術和新醫藥產業促進中心潘悅主任一行到威斯騰生物醫藥交流訪 問；

  2017年4月   威斯騰生物醫藥受邀參加四川省人民政府主辦的醫藥健康產業深度合作和創新發展座談會。

  企業文化

  公開透明的競爭文化機制

  競爭文化的培養是企業文化著重培養的重要內容，良好的競爭氛圍使每位員工不甘落后和停滯。采取正確的競爭策略，能夠極大地調動企業員工的積極性、創造性，煥發出競爭精神和創新精神，使人的潛能得到全面、充分地發揮，從而使整個企業的競爭能力得到全面地提高。

  公開透明的競爭機制的建立，使每位員工看到并享有暢通的晉升通道，保證每位員工在威斯騰都能一展所長。

  重視素質培養和全面發展

  威斯騰非常注重企業文化的建設，提倡“以人為本”的人才理念，關注員工的持續成長，倡導正能量，形成“勤奮，忠誠，熱情，向上”的企業文化。

  素質是人的品質、能力、素養的總稱，企業員工的職業素質是影響企業管理與發展的重要因素。高素質的人才，不在于經驗的長久，而在于長久的經驗培育出來的能力。提升員工素質是揭示各個方面及競爭力的利器。員工個人不僅可以參加企業組織的各種培訓，還主動積極的進行自我學習與提高，不斷的修煉自我，提高自身的職業素質，從而達到與時俱進，增強競爭力。

  和諧“家”文化

  公司提倡和諧“家”文化，致力于為員工提供良好的辦公環境、營造輕松舒適的辦公氛圍，公司在對員工關懷上下足了工夫，讓每一位企業員工真正感受企業文化的力量。”威斯騰管理委員會委員如是表示。一個好的公司，不能僅僅只注重品牌的打造，更要重視人才、重視技術、重視企業文化建設。這就是一個富有朝氣，活力的威斯騰生物！