western-blotting(WB/免疫印跡/蛋白質(zhì)印跡)、免疫共沉淀CO-IP、二維電泳、質(zhì)譜
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1、WB技術(shù)服務(wù)
Western Blotting即蛋白質(zhì)印跡,是分子生物學(xué)、生物化學(xué)和免疫遺傳學(xué)中常用的一種實(shí)驗(yàn)方法。其基本原理是通過特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色。通過分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中的表達(dá)信息,現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于基因在蛋白水平的表達(dá)研究、抗體活性檢測和疾病早期診斷等多個(gè)方面。
技術(shù)路線、服務(wù)周期
2、免疫共沉淀
免疫共沉淀(coimmunoprecipitation)是一種在體外探測兩個(gè)蛋白分子間是否存在特異性相互作用的一種方法。其原理是如果兩個(gè)蛋白在體外體系能夠發(fā)生特異性相互作用的話,那么當(dāng)用一種蛋白的抗體進(jìn)行免疫沉淀時(shí),另一個(gè)蛋白也會(huì)被同時(shí)沉淀下來。與酵母雙雜交技術(shù)不同,免疫共沉淀技術(shù)所利用的是抗原和抗體間的免疫反應(yīng),是一種基于體外非細(xì)胞的環(huán)境中研究蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)的相互作用的方法。
相互作用的蛋白質(zhì)都是經(jīng)翻譯后修飾的,處于天然狀態(tài);蛋白的相互作用是在自然狀態(tài)下進(jìn)行的,可以避免人為的影響;可以分離得到天然狀態(tài)的相互作用蛋白復(fù)合物。
實(shí)驗(yàn)步驟、服務(wù)周期。
3、蛋白質(zhì)雙向電泳
蛋白質(zhì)雙向電泳是將蛋白質(zhì)等電點(diǎn)和分子量兩種特性結(jié)合起來進(jìn)行蛋白質(zhì)分離的技術(shù)。蛋白質(zhì)的雙向電泳的第一向?yàn)榈入娋劢梗↖soelectrofocusing, IEF),根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)不同進(jìn)行分離;第二向?yàn)镾DS-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE),按亞基分子量大小進(jìn)行分離。經(jīng)過電荷和分子量兩次分離后,可以得到蛋白質(zhì)分子的等電點(diǎn)和分子量信息。
因而具有較高的分辨率和靈敏度,已成為蛋白質(zhì)特別是復(fù)雜體系中的蛋白質(zhì)檢測和分析的一種強(qiáng)有力的生化手段。
實(shí)驗(yàn)步驟、服務(wù)周期、結(jié)果示意圖
4、質(zhì)譜分析
蛋白質(zhì)譜鑒定是蛋白質(zhì)組學(xué)研究的核心技術(shù)之一,根據(jù)其檢索方式的不同又分為肽指紋圖譜檢索(Peptide MassFingerprint,PMF)、序列檢索(Sequence Query)以及串聯(lián)質(zhì)譜離子檢索(MS/MS Ion Search)等鑒定方法。其中串聯(lián)質(zhì)譜離子檢索已逐漸取代肽指紋圖譜檢索,成為目前最常用的質(zhì)譜鑒定方式,其豐富的肽段碎片質(zhì)譜信息使得即使對(duì)于混合蛋白以及大數(shù)據(jù)庫檢索也能獲得很可靠的結(jié)果。
服務(wù)周期
上海鈺森生物技術(shù)有限公司成立10多年,專注科研服務(wù),建立了自己的實(shí)驗(yàn)技術(shù)平臺(tái),能夠提供動(dòng)物造模、細(xì)胞培養(yǎng)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)(細(xì)胞染色、侵襲、趨化、轉(zhuǎn)移、增殖、活性、凋亡等)、免疫印跡(WB)、PCR和Q-PCR、免疫組化(IHC-P/F)、免疫共沉淀(Co-IP)、質(zhì)粒構(gòu)建、病毒包裝、RNA干擾……多項(xiàng)單項(xiàng)實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)和課題總包服務(wù),是國內(nèi)自建較全面基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)平臺(tái)、最早從事生物技術(shù)服務(wù)為數(shù)不多的公司之一。
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