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常規(guī)植物的根、莖、葉、花、果實(shí)、花芽、葉芽、等都做過。對(duì)于一些有特殊要求的樣品,也可以提供連續(xù)切技術(shù)服務(wù),通過將樣品連續(xù)切片的方式,找到需要觀察到的生長點(diǎn)。
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植物石蠟切片技術(shù)服務(wù)
植物石蠟切片技術(shù)是顯微技術(shù)上最重要最常用的一種方法,其優(yōu)點(diǎn)在于:1、應(yīng)用范圍廣,幾乎適用于所有植物材料;2、能切成極薄而且連續(xù)的切片,較清楚地顯現(xiàn)細(xì)胞、組織的細(xì)胞結(jié)構(gòu);3、切片可以長期保存、便于以后觀察比較。因此,這項(xiàng)技術(shù)自18世紀(jì)創(chuàng)建以來,在植物細(xì)胞、組織研究史上發(fā)揮了重要作用,并且在今后仍將作為一項(xiàng)常規(guī)技術(shù)而發(fā)揮作用。
植物石蠟切片技術(shù)整個(gè)過程較為復(fù)雜,可大致概括為:取材-固定-脫水-透明-浸蠟-包埋-修塊-切片-粘片-染色-制片。
取材:根據(jù)不同觀察研究的目的,選擇合適的材料。固定時(shí)應(yīng)根據(jù)材料的性質(zhì)及制片的目的選用固定液的用量,一般最少為所固定材料總體積的20倍。
固定:常用的固定液有FAA、卡諾和納瓦固定液。含水量大的材料,應(yīng)多換幾次固定液,保證固定液的濃度。對(duì)所固定材料的大小一般要求0.5-1平方厘米為宜,盡量小而薄。固定后,將樣品管置于真空泵中,反復(fù)抽氣。直到樣品沉入固定液,使樣品充分固定。固定完的材料,若不能及時(shí)制樣,可置于70%酒精中存放。
脫水:樣品置于樣品籃中,30%,50%,70%,85%,95%,100%酒精梯度脫水。
透明:樣本用純酒精和二甲苯1:1比例混合液處理2-3h,轉(zhuǎn)入純二甲苯中,每次1h,共處理2次。除去樣品中的酒精,使材料透明。
浸蠟:石蠟慢慢溶于透明劑中,然后完全取代透明劑進(jìn)入材料中,將上述已透明好的材料換入新的二甲苯中,然后加入等體積的碎蠟,置于4度冰箱中,備切片用。
包埋:浸足石蠟的材料包埋在石蠟里成為一定形狀以利于切片。浸蠟后沒在60度烘箱中,換2次已溶解的純蠟,每次2h。
修塊:將包埋好的材料切成小塊,每個(gè)小塊包含一個(gè)材料。然后按想要的切面將蠟塊切成梯形,切面在梯形上部,
切片:切片厚度8-10um
粘片:切好的蠟片沾在載玻片上的過程。
染色制片:常用染色方法有番紅固綠染色、甲苯胺藍(lán)染色、尼羅紅染色、油紅O染色、HE染色等等。
封片拍照:普通光學(xué)顯微鏡拍照。
邁斯普生物專業(yè)提供植物石蠟切片技術(shù)服務(wù)。自公司成立以來,已為廣大科研客戶提供過幾千例不同植物不同組織的石蠟切片技術(shù)服務(wù)。可以做常規(guī)切片和連續(xù)切片。例如水稻、玉米、大豆、高粱、櫻桃、辣椒、杏、李、百合、蘋果、油菜。對(duì)于植物的根、莖、葉、花、果實(shí)、柱頭、葉芽、花芽等都有經(jīng)驗(yàn)。花芽發(fā)育、葉芽發(fā)育、果實(shí)發(fā)育、花粉管萌發(fā)、常規(guī)的葉、幼嫩莖稈等形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)都可以提供相關(guān)技術(shù)服務(wù)。歡迎咨詢!
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