技術(shù)服務(wù)詳細(xì)描述

一、應(yīng)用領(lǐng)域：

1.基因突變 / 重組 / 高效表達(dá)

2.其他方法難以獲得的 cDNA

3.合成不同的基因變異或新基因

4.用于微芯片的大量 cDNA

二、服務(wù)特色：

1. 免費(fèi)提供基因的參考設(shè)計(jì)方案，包括設(shè)計(jì)酶切位點(diǎn)，密碼子優(yōu)化等

2. 基因合成周期短，嚴(yán)格按照與用戶簽定的基因合成服務(wù)協(xié)議和保密合同執(zhí)行

3. 能合成長(zhǎng)度達(dá) 10 kb 的基因

4. 基因克隆到用戶指定或提供的表達(dá)載體上

5. 質(zhì)量可靠，提供 DNA 測(cè)序結(jié)果，保證所合成的基因序列 100% 準(zhǔn)確

三、服務(wù)流程：

    收到客戶提供序列后，確定使用何種酶切位點(diǎn)克隆，克隆到何種載體等等，然后對(duì)全序列進(jìn)行編輯，傳至客戶確認(rèn)

    經(jīng)分析確認(rèn)達(dá)成一致意見(jiàn)后，簽訂基因合成服務(wù)協(xié)議與保密合同。

    設(shè)計(jì)Oligo合成方案，在全自動(dòng)合成儀器上進(jìn)行單鏈的化學(xué)合成

    通過(guò)OVER-LAP的PCR，把單鏈Oligo拼接成雙鏈的全長(zhǎng)基因

    將PCR產(chǎn)物酶切、純化，連接到質(zhì)粒中，將質(zhì)粒轉(zhuǎn)入細(xì)胞株培養(yǎng)

    提取陽(yáng)性克隆進(jìn)行DNA測(cè)序，確認(rèn)插入片段的準(zhǔn)確性

    對(duì)可能存在的錯(cuò)誤位點(diǎn)用定點(diǎn)突變的方法加以改正，再經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證

    提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告，包括裝載目的基因的質(zhì)粒、細(xì)菌株、測(cè)序圖譜/序列

    合成完畢后，本公司通知客戶，收到全部貨款，本公司開(kāi)始發(fā)貨

四、情況說(shuō)明

    1、由于基因結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性，并不是所有的片段都能順利合成。對(duì)于較長(zhǎng)的片段或一些復(fù)雜結(jié)構(gòu)如重復(fù)序列、高 GC 片段等，可能會(huì)需要額外的時(shí)間調(diào)整合成方案。如果發(fā)生這種情況，技術(shù)人員會(huì)及時(shí)與您聯(lián)系，告知您合成進(jìn)程。

    2、所合成的基因一般克隆于通用載體中，如需克隆在客戶指定的載體中，我公司會(huì)酌情再收取一定的費(fèi)用，并且交貨時(shí)間會(huì)適當(dāng)延長(zhǎng)。

五、密碼子優(yōu)化：

　　對(duì)于密碼子優(yōu)化服務(wù)，在提供需要優(yōu)化和合成的基因序列的同時(shí)，我們還需要如下訊息：

1. 需要合成的蛋白或 DNA 序列

2. 宿主表達(dá)系統(tǒng)

3. 兩端的限制性酶切位點(diǎn)

4. 優(yōu)化后的序列中需要避免的限制性酶切位點(diǎn)

5. 優(yōu)化后的序列中需要保留的限制性酶切位點(diǎn)

六、交付技術(shù)資料與產(chǎn)品

1、不少于2ug的含目的基因的通用載體質(zhì)粒一份

2、含上述質(zhì)粒的大腸桿菌菌株一份

3、基因序列100%正確的原始報(bào)告測(cè)序正本一份

4、基因合成報(bào)告一份

七：全基因合成服務(wù)要求

1.  請(qǐng)將您需要合成的基因全序列以 E-mail 或傳真的形式告知公司的業(yè)務(wù)員或公司的技術(shù)員。

2.  請(qǐng)說(shuō)明實(shí)驗(yàn)的具體要求，如：使用何種酶切位點(diǎn)進(jìn)行克隆以及需克隆于何種載體等。

3. 測(cè)序結(jié)果如果發(fā)現(xiàn)有錯(cuò)誤位點(diǎn)，我們會(huì)采取相應(yīng)的技術(shù)手段進(jìn)行修復(fù)校對(duì)，保證整個(gè)序列的正確性。

4. 提供實(shí)驗(yàn)結(jié)果：包括實(shí)驗(yàn)操作規(guī)程、測(cè)序結(jié)果、測(cè)序彩色峰圖、含有合成基因的質(zhì)粒及含該質(zhì)粒的菌體( 穿刺菌 )等。 

上海賽恒生物科技有限公司，是一家以提供各類(lèi)技術(shù)服務(wù)和生命科學(xué)研究所需的實(shí)驗(yàn)室試劑、儀器耗材的專業(yè)化公司。公司產(chǎn)品覆蓋了DNA合成、DNA測(cè)序、DNA克隆、全基因合成、SNP基因分型、多肽合成、各種酶類(lèi)、分子生物學(xué)試劑盒等。公司一直致力于向國(guó)內(nèi)外廣大生命科學(xué)研究人員提供質(zhì)優(yōu)價(jià)廉的產(chǎn)品和專業(yè)的技術(shù)服務(wù)。