轉(zhuǎn)錄組學(xué)(Transcriptomics)是使用高通量測序技術(shù),全面快速獲取某一物種特定組織或器官在某一狀態(tài)下RNA序列信息,并對其結(jié)構(gòu)和表達(dá)信息進(jìn)行分析。
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轉(zhuǎn)錄組(Transcriptome)是指一個(gè)活細(xì)胞所能轉(zhuǎn)錄出來的所有RNA的總和,是研究細(xì)胞表型和功能的一個(gè)重要手段。轉(zhuǎn)錄組學(xué)(Transcriptomics)是使用高通量測序技術(shù),全面快速獲取某一物種特定組織或器官在某一狀態(tài)下RNA序列信息,并對其結(jié)構(gòu)和表達(dá)信息進(jìn)行分析。可用于預(yù)測基因結(jié)構(gòu)、可變剪切和其他轉(zhuǎn)錄修飾,并可定量測定每個(gè)轉(zhuǎn)錄本在生長過程中和不同條件下表達(dá)水平的變化。
(Schematics of RNA-Seq workflow. Wang Y et al., Bioinformatics. 2011)
麥特繪譜可提供的技術(shù)服務(wù):
1)真核有參轉(zhuǎn)錄組測序
真核生物轉(zhuǎn)錄組測序可以分為有參和無參的情況。真核有參轉(zhuǎn)錄組測序,指對已有參考基因組的真核生物或其組織、細(xì)胞等進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序。通過與參考基因組比對,可驗(yàn)證轉(zhuǎn)錄組測序的測序飽和度和基因覆蓋度,同時(shí)可獲得基因結(jié)構(gòu)、基因表達(dá)差異,和可變剪接等信息。
2)真核無參轉(zhuǎn)錄組測序
真核生物轉(zhuǎn)錄組測序可以分為有參和無參的情況。真核無參轉(zhuǎn)錄組測序,指在無參考基因組的情況下,對真核生物轉(zhuǎn)錄組進(jìn)行測序。真核無參轉(zhuǎn)錄組測序在獲得原始數(shù)據(jù)后,首先要進(jìn)行質(zhì)控拼接為unigene,再以unigene為參考序列進(jìn)行后續(xù)分析,包括功能注釋、SNP、SSR標(biāo)記開發(fā)等。也可以對多個(gè)樣本進(jìn)行差異基因表達(dá)分析和差異基因功能富集分析等,用于發(fā)現(xiàn)功能基因,為下一步研究提供方向。
3)原核轉(zhuǎn)錄組測序
原核轉(zhuǎn)錄組測序可以從基因表達(dá)量、基因結(jié)構(gòu)和sRNA調(diào)控功能三維度揭示不同生物性狀的分子調(diào)控機(jī)制。如通過計(jì)算各組間的差異基因并對差異基因進(jìn)行富集分析,獲得對生物性狀影響較大的通路信息;通過預(yù)測基因的反義轉(zhuǎn)錄本,豐富基因組注釋內(nèi)容;研究sRNA對mRNA的相互作用,從分子調(diào)控角度解釋生物性狀之間的差異。
4)全轉(zhuǎn)錄組測序
全轉(zhuǎn)錄組即特定細(xì)胞或組織在某一功能狀態(tài)下轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 (mRNA、 LncRNA、 CircRNA 以及 microRNA) 的合集。全轉(zhuǎn)錄組測序可對同一個(gè)樣品同時(shí)進(jìn)行 mRNA、 LncRNA、 CircRNA 和 microRNA 的單獨(dú)分析,還可進(jìn)行多種 RNA聯(lián)合分析以及內(nèi)源競爭性 RNA 整合分析,分子標(biāo)記篩選等,探究其潛在的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)機(jī)制,揭示轉(zhuǎn)錄調(diào)控問題。主要應(yīng)用于免疫機(jī)制、疾病領(lǐng)域、發(fā)育進(jìn)化、致病機(jī)理和藥物靶標(biāo)等方面的研究。
5)三代全長轉(zhuǎn)錄組測序
基于三代測序平臺的全長轉(zhuǎn)錄組測序,可直接獲取mRNA全長序列,更為準(zhǔn)確地解讀mRNA結(jié)構(gòu)信息,重點(diǎn)關(guān)注基因的可變剪切、融合基因等。應(yīng)用領(lǐng)域:獲得基因組未知物種的基因集,用于基因功能研究;基因結(jié)構(gòu)差異分析;發(fā)現(xiàn)新轉(zhuǎn)錄本;分子機(jī)制研究;基因表達(dá)調(diào)控研究等。
樣本量推薦:
組織:200 mg
細(xì)胞:10E6
細(xì)菌:濕重0.2g