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MassARRAY® DNA 甲基化分析定制服務
MassARRAY®EpiTYPER™ DNA 甲基化分析技術結合了堿基特異性酶切反應和 MALDI-TOF 檢測原理用于DNA 甲基化定量分析。
服務類別:芯片與生物信息學總訪問:5859
最后更新:2015-1-16半年訪問:94
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  • 公司簡介

MassARRAY®EpiTYPER™ DNA 甲基化分析技術結合了堿基特異性酶切反應和 MALDI-TOF 檢測原理用于DNA 甲基化定量分析。可實現多重 CpG 的分析檢測,是用于 DNA 甲基化定量分析及在基因組任何區域或者候選基因中鑒定甲基化定量分析的首選方法。

堿基特異性酶切(MassCLEAVE)實驗由亞硫酸鹽處理待測 DNA 開始。經過亞硫酸鹽處理,DNA中的未甲基化的胞嘧啶 (C) 轉變為尿嘧啶(U),由此在 DNA 模板中產生甲基化特異的序列變化。利用 5' 末端帶有T7-啟動子的引物進行 PCR 擴增,產物經 SAP (蝦堿性磷酸酶)處理后用于堿基特異性的酶切反應。酶切后 DNA 片段的大小和分子量取決于亞硫酸鹽處理后的堿基變化,飛行質譜能測出每個片段的分子量,配套軟件 EpiTYPER 則能自動報告每個相應片段的甲基化程度。
 
服務流程
   客戶提供 DNA 或者生物樣本
   樣本前處理
   PCR 擴增、SAP、Transcription、Cleavage
   點樣
   質譜檢測
   分析報告
 
技術特點
   高性能
●   能夠分析覆蓋長達 600bp 的多個 CpG 位點
●   能夠分析福爾馬林處理的石蠟組織
●   無需任何熒光標記
   高靈敏度
●   精度高(5%CV)
●   檢測低至 5% 的甲基化水平
●   分析需要的起始樣本量少(<5pg)
   高性價比
●   用384孔板進行 PCR 反應
●   一個擴增產物可以進行多重 CpG位點分析
●   無需后續驗證,可直接發表結果
   操作簡便
●   無需設計 CpG 位點特異性引物
●   無需進行 PCR 產物純化
●   研究幾個到幾百個甲基化位點的理想手段
 
參考文獻
   HEIJMANS, B., et al. (2007) “Heritable rather than age-related environmental and stochastic factors dominate variation in DNA methylation of the human 1GF2/H19 locus” Hum Mol Genet 16(5):547-54.
   RAVAL, A., et al. (2007). “Downregulation of Death-Associated Protein Kinase 1(DAPK1) in chronic lymphocytic leukemia.” Cell 129: 879-90.
   RICHTER, E., et al. (2007). “A role for DNA methylation in regulating the growth suppressor PMEPA1 gene in prostate cancer.” Epigenetics 2(2):100-105.
 
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