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蛋白測序服務
蛋白測序服務基于Edman降解法。一個循環由一個完整的化學降解過程和即時的HPLC分析組成,一個循環可測定一個氨基酸。
服務類別:測序/合成總訪問:3461
最后更新:2022-7-18半年訪問:59
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蛋白測序服務:

      蛋白測序現在已經成為現代分子生物學實驗中一個非常重要的實驗工具。齊氏生物科技推出的蛋白測序服務基于Edman降解法。一個循環由一個完整的化學降解過程和即時的HPLC分析組成,一個循環可測定一個氨基酸。

一、樣品制備:
1、PVDF膜結合的樣品(請提供整膜);
2、HPLC純化后的凍干粉樣品。

二、樣品建議:
1、樣品不能含有下列會干擾蛋白測序的物質: 去污劑(Detergents)/ 鹽分(Salts)/ 非揮發性緩沖液(Non volatile buffers) / 胺(Amines)/氨基酸(Amino acids);
2、表面吸附往往會導致樣品的回收率較低,需要避免因吸附而導致樣品丟失,下面有一些小竅門有助于解決這個問題:
1)避免透析;2)不要讓樣品干透;3)用盡可能小的管;4)特殊的疏水性蛋白最多可加SDS至0.05 %以減少吸附損失。
3、在SDS-PAGE 電泳純化蛋白時,注意下面一些事項:
1)每三至四周配置一次丙烯酰胺儲液;2)聚合過夜使膠聚合充分;3)用盡可能薄的膠來分離
4、上樣之前預電泳數分鐘,充分上樣;
5、 使每條帶能有1-5 ug的目的蛋白。

三、客戶提供樣品的信息:
1、至少提供20pmol的量,最好提供50-100pmol,以便我們有足夠的量進行重復測序;
2、最少達到75%的純度(基于摩爾數);
3、不能含有任何非揮發性的緩沖液,避免氨基酸污染(Tris-glycine緩沖體系不合適 );
4、客戶期望測得的氨基酸個數 / 分子量 / 組織來源 / 制備方法等。

四、蛋白測序報價:
開機費:¥1500元,含前5個氨基酸測序的費用;此部分款項需預付,無結果不再退還。
每循環:¥200元。
例如,一個樣品,測N端15個氨基酸,預期費用為1500+(15-5)* 200 = ¥3500元
 

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