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使用eBioscience流式抗體的常見問題

瀏覽次數(shù):6331 發(fā)布日期:2014-3-16  來源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)

Q. 是否能渦旋震蕩抗體或重組蛋白?

   我們不推薦震蕩蛋白或抗體溶液,這會改變產(chǎn)品的特性。通常在運輸過程中,液體有可能已經(jīng)分散在管子中。推薦使用之前,瞬時離心,這樣抗體會沉到管底,以達(dá)到標(biāo)示的體積。

Q. 我能渦旋震蕩已經(jīng)標(biāo)記了抗體的細(xì)胞樣品嗎?

  可以,短時震蕩能保持細(xì)胞的最佳狀態(tài)。

Q. 標(biāo)記了tandem染料如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等的細(xì)胞樣品能固定并保存嗎?

  大多數(shù)情況下,可以將樣品保存在IC Fixation Buffer(cat. 00-8222)(100 μL樣品混合100 μL IC Fixation Buffer)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中,暗處4°C 最長可以保存3天,對檢測沒有影響。某些影響可能與克隆號有關(guān)。

Q. 不能馬上檢測的樣品,我該如何保存?

  首先,要獲得最好的效果,一定是推薦立即上機檢測。
  
要保存染色完成的樣品,可以在IC Fixation Buffer (cat. 00-8222) (100 μL樣品混合100 μL IC Fixation Buffer) 或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中固定保存,暗處4°C 最長可以保存3天。對于tandem染料,如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等,eBioscience的數(shù)據(jù)顯示不會增加它們與APC或者PE的補償。某些影響可能與克隆號有關(guān)。

Q. 我可以用自己配制的固定緩沖液來保存細(xì)胞嗎?

  我們不推薦使用其他緩沖液,我們只能確保IC Fixation Buffer (cat. 00-8222)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)的保存效果。

Q. 有文獻(xiàn)提到與DEC205+ cells存在不兼容的情況,我能選擇哪些其他的標(biāo)記呢?

  其實CD205已被證實可以與PE-Cy5.5標(biāo)記抗體和鏈霉親和素標(biāo)記物結(jié)合 (Part et al. 2012 J. Immunol Methods 384:184-90); 然而,不能用于CD205+ 的樹突狀細(xì)胞。我們推薦使用 PerCP-Cy5.5 或者PerCP-eFluor 710 標(biāo)記來替代。

Q. 是否能渦旋震蕩抗體或重組蛋白?

   我們不推薦震蕩蛋白或抗體溶液,這會改變產(chǎn)品的特性。通常在運輸過程中,液體有可能已經(jīng)分散在管子中。推薦使用之前,瞬時離心,這樣抗體會沉到管底,以達(dá)到標(biāo)示的體積。

Q. 我能渦旋震蕩已經(jīng)標(biāo)記了抗體的細(xì)胞樣品嗎?

  可以,短時震蕩能保持細(xì)胞的最佳狀態(tài)。

Q. 標(biāo)記了tandem染料如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等的細(xì)胞樣品能固定并保存嗎?

  大多數(shù)情況下,可以將樣品保存在IC Fixation Buffer(cat. 00-8222)(100 μL樣品混合100 μL IC Fixation Buffer)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中,暗處4°C 最長可以保存3天,對檢測沒有影響。某些影響可能與克隆號有關(guān)。

Q. 不能馬上檢測的樣品,我該如何保存?

  首先,要獲得最好的效果,一定是推薦立即上機檢測。
  
要保存染色完成的樣品,可以在IC Fixation Buffer (cat. 00-8222) (100 μL樣品混合100 μL IC Fixation Buffer) 或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)中固定保存,暗處4°C 最長可以保存3天。對于tandem染料,如 APC-eFluor? 780, PE-Cy7等,eBioscience的數(shù)據(jù)顯示不會增加它們與APC或者PE的補償。某些影響可能與克隆號有關(guān)。

Q. 我可以用自己配制的固定緩沖液來保存細(xì)胞嗎?

  我們不推薦使用其他緩沖液,我們只能確保IC Fixation Buffer (cat. 00-8222)或者 1-step Fix/Lyse Solution (cat. 00-5333)的保存效果。

Q. 有文獻(xiàn)提到與DEC205+ cells存在不兼容的情況,我能選擇哪些其他的標(biāo)記呢?

  其實CD205已被證實可以與PE-Cy5.5標(biāo)記抗體和鏈霉親和素標(biāo)記物結(jié)合 (Part et al. 2012 J. Immunol Methods 384:184-90); 然而,不能用于CD205+ 的樹突狀細(xì)胞。我們推薦使用 PerCP-Cy5.5 或者PerCP-eFluor 710 標(biāo)記來替代。

 

閱讀原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2014030017.html

發(fā)布者:杭州聯(lián)科生物技術(shù)股份有限公司
聯(lián)系電話:4006721600
E-mail:network@liankebio.com

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