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BIOG細菌RNA提取試劑盒使用說明書

瀏覽次數:4394 發布日期:2016-3-14  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

運輸條件:常溫運輸

    :51039: 50次反應

          51040: 100次反應  

產品特點

◎提取RNA純度高,無抑制劑,A260/A280為1.8-2.0;

◎產率高,同樣的樣本量提取的RNA更多。

◎不含苯酚和氯仿等有毒溶劑,安全無毒。

◎對于革蘭氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌有較好的提取效果。

試劑盒組成

組分

50

100

吸附柱和收集管

各50個

各100個

裂解液I

12 mL

24mL

裂解液Ⅱ

12 mL

24mL

析出液

4.5 mL

9 mL

洗滌液

9 mL

18 mL

洗脫液

12mL

24 mL

消化液

1.2 mL

2.4 mL

說明書

1份

1份

產品介紹 

BIOG RNA Bacteria Kit適用于革蘭氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌。對于細菌壁較厚的革蘭氏陽性菌、真菌、細菌芽孢等須首先破壁處理。BIOG RNA Bacteria Kit采用復合消化液消化菌體中的蛋白質,使細胞RNA更容易釋放出來,因而本試劑盒RNA提取產率較高。BIOG RNA Bacteria Kit采用了最新的離子膜技術并反復優化了裂解液和洗脫液配方,提取得到的RNA純度更高,最大限度地去除了蛋白、脂類等雜質污染,可以直接應用于Northern 雜交、RT-PCR、Real Time RT-PCR、 cDNA 文庫構建、體外翻譯等各種常規分子生物學實驗。

操作步驟:

1.請自行準備:無水乙醇、生理鹽水及無RNA酶的1.5mL離心管。

2.取出析出液和洗滌液,按以下操作:

a) 析出液:4.5mL加入25.5mL無水乙醇;9mL加入51mL無水乙醇。

b) 洗滌液:9mL加入21mL無水乙醇;18mL加入42mL無水乙醇。

c) 配制好的析出液如出現沉淀,可在37℃溶解,搖勻后使用。

3.細菌處理:將收集的細菌5,000 rpm離心3分鐘,棄上清,加入200μL生理鹽水,振蕩混勻,5,000 rpm離心3分鐘,棄上清。

4.a) 對于革蘭氏陰性菌和一般的革蘭氏陽性菌,加入200μL裂解液Ⅰ,懸浮沉淀,37℃放置30分鐘。

b) 對于細菌壁較厚的革蘭氏陽性菌、真菌、細菌芽孢等須首先自行進行破壁處理,處理結束后進行步驟5操作。

5.加入200 μL 裂解液Ⅱ,20μL消化液,充分振蕩混勻, 56℃水浴10 分鐘。

6.加入600μL析出液,輕輕顛倒混勻,如有半透明懸浮物,不影響RNA的提取與后續實驗。

7.將吸附柱放入收集管內,取上述溶液600μL轉入吸附柱內,靜置2 分鐘,12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內廢液。

8.將剩余400μL液體轉入上述吸附柱內,重復操作步驟7。

9.將吸附柱放回收集管內,加500μL 洗滌液至吸附柱內,12,000 rpm 4℃離心1 分鐘,棄收集管內廢液。

10.將吸附柱放回收集管內,12,000 rpm 4℃離心2 分鐘,離去殘留的洗滌液。

11.取出吸附柱,放入新的無RNA酶的1.5 mL 離心管內,加入50-200 μL 洗脫液,靜置3分鐘,12,000 rpm  4℃ 離心2分鐘,收集RNA溶液。提取的RNA -70℃保存,或直接用于下一步實驗。

注意事項:

  1. 析出液、洗滌液含有刺激性化學物質,操作過程請做好防護措施,避免直接接觸皮膚,防止吸入口鼻。如不慎沾染皮膚或眼睛,請立即用清水或生理鹽水沖洗,必要時請就醫。
  2. 細菌量建議不高于107
  3. 裂解液Ⅱ如有白色絮狀物析出屬正常現象,置于37℃水浴中溶解即可。

儲存、運輸和有效期

 

本試劑盒可常溫運輸,室溫(15-25℃)保存,有效期為12個月,消化液請于-20℃存放,避免反復凍融,裂解液Ⅰ請于4℃保存。

質量控制

本產品經嚴格的質量檢驗證明,無生物污染

注意 本產品僅用于科研

常州百代生物科技有限公司

 

地址:常州市東方東路51號新東方物流園   電話: 0519-88050392    傳真: 0519-83382790

發布者:常州百代生物科技有限公司
聯系電話:0519-88050392-608
E-mail:663379957@qq.com

標簽: 細菌RNA提取
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