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武漢伊萊瑞特教你計算ELISA結果

瀏覽次數:3735 發布日期:2018-7-6  來源:www.elabscience.cn

作為ELISA的最后一步,檢測結果的計算對整個實驗十分重要。

以夾心法為例。

1.  ELISA的樣本通常要設置1~2個復孔進行檢測,分別求出標準品、實驗組樣本的吸光度的平均值。單個樣本的檢測值不應超出平均值的20%。

2.  樣本的OD(吸光度)平均值要減去標準品濃度為0時的OD平均值。

3.  建立標準曲線

        在對數坐標圖上擬合四參數的邏輯函數曲線(X軸上為標準品濃度,Y軸為對應的OD值)。推薦使用origin軟件。

詳細步驟如下:

第一步輸入OD值和標準品濃度

 

第二步:選擇擬合曲線類型

選中輸入的數值框,按如下操作依次點擊選項。

第三步:勾選“find specific X/Y”

 

完成上述操作后,點擊Fit按鍵,擬合曲線和相關信息將自動生成(如第四步所示)

 

第四步:查看標準曲線信息(如參數值,R-Square等)

 

第五步:設置坐標軸類型為對數。

雙擊第四步中的擬合曲線圖,對其進行編輯。雙擊X軸、Y軸設置坐標類型為“Log10”。

 

第六步:根據標準曲線計算樣本濃度

選擇第四個工作表(Fit NLF Find X from Y1),在左列輸入樣本的OD值,對應的濃度將在右列自動生成。

如果樣本的OD值超出標準曲線的上限,請在實驗前適當稀釋樣本以獲得精確結果。在分析數據時,樣本實際濃度應為標準曲線上獲得的濃度乘以稀釋倍數。

發布者:武漢伊萊瑞特生物科技股份有限公司
聯系電話:400-999-2100
E-mail:marketing@elabscience.cn

標簽: ELISA
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