作為ELISA的最后一步，檢測結果的計算對整個實驗十分重要。

以夾心法為例。

1.  ELISA的樣本通常要設置1~2個復孔進行檢測，分別求出標準品、實驗組樣本的吸光度的平均值。單個樣本的檢測值不應超出平均值的20%。

2.  樣本的OD（吸光度）平均值要減去標準品濃度為0時的OD平均值。

3.  建立標準曲線

        在對數坐標圖上擬合四參數的邏輯函數曲線（X軸上為標準品濃度，Y軸為對應的OD值）。推薦使用origin軟件。

詳細步驟如下：

第一步: 輸入OD值和標準品濃度

第二步：選擇擬合曲線類型

選中輸入的數值框，按如下操作依次點擊選項。

第三步：勾選“find specific X/Y”

完成上述操作后，點擊Fit按鍵，擬合曲線和相關信息將自動生成（如第四步所示）

第四步：查看標準曲線信息（如參數值，R-Square等）

第五步：設置坐標軸類型為對數。

雙擊第四步中的擬合曲線圖，對其進行編輯。雙擊X軸、Y軸設置坐標類型為“Log10”。

第六步：根據標準曲線計算樣本濃度

選擇第四個工作表（Fit NLF Find X from Y1），在左列輸入樣本的OD值，對應的濃度將在右列自動生成。

如果樣本的OD值超出標準曲線的上限，請在實驗前適當稀釋樣本以獲得精確結果。在分析數據時，樣本實際濃度應為標準曲線上獲得的濃度乘以稀釋倍數。