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金屬硫蛋白含量檢測試劑盒的檢測原理及操作方法(人源)

瀏覽次數:5304 發布日期:2019-3-18  來源:上海仁捷生物科技有限公司
金屬硫蛋白含量檢測試劑盒的檢測原理及操作方法(人源)
人金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒
英文名稱:Human MT ELISA Kit
實驗類型:夾心法
檢測范圍:75 pg/mL – 2400 pg/mL
最低檢測限:10 pg/mL
應用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細胞培養物上清或其它相關液體(本產品僅供實驗室科研及非臨床用途)

操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。

實驗原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被人金屬硫蛋白(MT)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人金屬硫蛋白(MT)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

 

 

 

人金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒組成
試劑盒組成 96孔配置 48孔配置 備注
微孔酶標板 8孔×12條 8孔×6條  無
標準品 0.3mL×6管 0.3mL×6管
樣本稀釋液 6mL 3mL
檢測抗體-HRP 10mL 5mL
20×洗滌緩沖液 25mL 15mL 按說明書進行稀釋
底物A 6mL 3mL
底物B 6mL 3mL
終止液 6mL 3mL
封板膜 2張 2張
說明書 1份 1份
自封袋 1個 1個

備注:

1. 標準品濃度依次為:2400、1200、600、300、150、0 pg/mL

2. 經過大量正常標本檢驗,標本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內,實驗過程中直接取50μL樣本上樣即可。當有部分樣本值超過最大標準品濃度時,可用樣本稀釋液將標本進行適當稀釋后再進行實驗。

發布者:上海仁捷生物科技有限公司
聯系電話:021-60346444
E-mail:2450868877@qq.com

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