產品名稱：草魚呼腸孤病毒3型PCR檢測試劑盒

英文名稱：Grass Carp Reovirus(GCRV)3RTPCR

規格：50T

技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現，DNA在高溫時也可以發生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）

發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。

使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在00 mg 左右的植物種子（約/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當的其他形狀）的植物葉片直接加到新鮮配制的0. mL溶液A 中，95℃保溫0-5 分鐘，加入0. mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當于PCR 體積的/0）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

技術特點：
準確可靠，臨床雙盲對照試驗＞000例，結果與金標準測序法比對，結果*性大于99%。
2高靈敏：可檢測低至0ng的人基因組DNA。
3快速：整個檢測流程只需3小時。
4簡便：試劑盒提供預混好的試劑，使體系配置操作簡便。
5防污染
6產品僅用于科研高特異性：雙重特異性組成，保證檢測結果的特異性和準確性引物與DNA互補鏈結合必需完全配對，才能延伸。探針特異性與所檢測基因的PCR產物配對，在延伸中產生熒光。

產品及特點：
. 即開即用，用戶只需要提供伴放線放線桿菌樣品。
2. 根據伴放線放線桿菌保守序列設計的專一性引物，與相關病毒無交叉反應。
3. 靈敏度可以達到幾百拷貝/反應。
4. 一管式熒光定量PCR檢測，避免后續污染。
5. 產品僅用于科研本試劑盒足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。

注意事項：   
草魚呼腸孤病毒3型PCR檢測試劑盒
使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。
2 操作時應盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區域進行，以避免交叉污染。
3 實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進行上下倒置多次進行混勻）。
4 反應管中加好所有的試劑后，應盡快上PCR儀進行擴增，以免形成過多的二聚體。
5細胞培養物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度，建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養2-3天后送樣檢測。

PCR反應的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高
PCR產物的生成量是以指數方式增加的，能將皮克(pg=0-2g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=0-6g)水平。能從00萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或細菌及培養細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發、細胞、活PCR技術概論。
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運輸及保存：
低溫運輸，-20℃保存，保存期限一年。
自備試劑
DNA模板、0×ROX（根據機型決定，具體見使用方法）。