鱟試驗(yàn)法中有關(guān)內(nèi)毒素與熱原及內(nèi)毒素抑制因子的問題
目前很多文獻(xiàn)中，熱原與內(nèi)毒素為同義詞，經(jīng)�；ビ�。但并不是所有的內(nèi)毒素均有很強(qiáng)的致熱性，因?yàn)橐呀?jīng)證明某些天然的內(nèi)毒素致熱性較弱、需要較大的劑量（如＞2μg/kg)時(shí)才能引起發(fā)熱。反之，亦并不是所有的能引起發(fā)熱的物質(zhì)均為內(nèi)毒素。許多化學(xué)物質(zhì)，特別是中樞作用藥如利血平、丙咪嗪、5-羥色胺、胍乙啶在一定條件下亦能致熱。各種微生物及其產(chǎn)物、免疫復(fù)合物及激素等均可引起發(fā)熱。而這些發(fā)熱物質(zhì)易被熱力破壞，故大輸液和藥品、器械在工業(yè)生產(chǎn)過程中容易防止污染而被清除，僅有內(nèi)毒素難以清除，易造成危害。
二、內(nèi)毒素抑制因子問題
內(nèi)毒素抑制因子又稱內(nèi)毒素抑制物質(zhì)、主要存在于血漿中。血漿中內(nèi)毒素抑制因子很多，因此內(nèi)毒素抑制因子并非僅為一種單一的成分，而是由好幾種（甚至數(shù)十種〉物質(zhì)組成。內(nèi)毒素抑制因子與內(nèi)毒素的作用為一種可逆的反應(yīng)，并不破壞內(nèi)毒素，當(dāng)采取各種方法除去或破壞這些抑制因子后，內(nèi)毒素的活性可以完全恢復(fù)。
目前對內(nèi)毒素抑制因子的本質(zhì)尚未完全搞清，一般認(rèn)為可能有以下幾類:
1.蛋白酶類
有人發(fā)現(xiàn)血清中的兩種α2球蛋白對內(nèi)毒素有抑制作用。在Ca++存在下，一種耐熱的血清酯酶有抗內(nèi)毒素的作用，另一種不耐熱的α-球蛋白可使LPS碎片去毒性。日本學(xué)者小林正義從血清中分離到稱為E1和E3的內(nèi)毒素抑制因子,根據(jù)其分子量、碳水化-物含量、氨基酸成分，以及應(yīng)用免疫擴(kuò)散及免疫電泳技術(shù)證明E1即α1 -抗胰蛋白酶（α1 -AT），E3即抗凝血酶Ⅲ(A t-Ⅲ )。繼而，用純化的α1 -AT及At-Ⅲ亦證實(shí)其有抑制LT反應(yīng)的作用。其中的α1 -AT的抑制作用強(qiáng)，At一Ⅲ的抑制作用較弱。但后者在肝素存在時(shí)，抑制作用可增強(qiáng)。
2.菌體抗體
亦稱O抗體，為內(nèi)毒素O抗原刺激機(jī)體而產(chǎn)生的。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證明，抗體對LT（鱟試驗(yàn)法，Limulus test）反應(yīng)有抑制作用，抑制機(jī)理可能為與內(nèi)毒素的O抗原結(jié)合。O抗體的抑制作用是有型特異性的，與補(bǔ)體無關(guān)。其它如膽汁酸鹽、藥物（EDTA，肝素、青霉素和多粘菌素B等）對LT反應(yīng)亦有抑制作用。
常用除去血漿抑制因子方法的除去能力如表3所示。
從表3的結(jié)果可以看出，上述幾種方法均不能完全去除血漿中的抑制因子。今后宜加強(qiáng)這方面的研究。
