作為ELISA的最后一步，檢測結(jié)果的計算對整個實驗十分重要。

以夾心法為例。

1.  ELISA的樣本通常要設(shè)置1~2個復(fù)孔進行檢測，分別求出標(biāo)準(zhǔn)品、實驗組樣本的吸光度的平均值。單個樣本的檢測值不應(yīng)超出平均值的20%。

2.  樣本的OD（吸光度）平均值要減去標(biāo)準(zhǔn)品濃度為0時的OD平均值。

3.  建立標(biāo)準(zhǔn)曲線

        在對數(shù)坐標(biāo)圖上擬合四參數(shù)的邏輯函數(shù)曲線（X軸上為標(biāo)準(zhǔn)品濃度，Y軸為對應(yīng)的OD值）。推薦使用origin軟件。

詳細(xì)步驟如下：

第一步: 輸入OD值和標(biāo)準(zhǔn)品濃度

第二步：選擇擬合曲線類型

選中輸入的數(shù)值框，按如下操作依次點擊選項。

第三步：勾選“find specific X/Y”

完成上述操作后，點擊Fit按鍵，擬合曲線和相關(guān)信息將自動生成（如第四步所示）

第四步：查看標(biāo)準(zhǔn)曲線信息（如參數(shù)值，R-Square等）

第五步：設(shè)置坐標(biāo)軸類型為對數(shù)。

雙擊第四步中的擬合曲線圖，對其進行編輯。雙擊X軸、Y軸設(shè)置坐標(biāo)類型為“Log10”。

第六步：根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本濃度

選擇第四個工作表（Fit NLF Find X from Y1），在左列輸入樣本的OD值，對應(yīng)的濃度將在右列自動生成。

如果樣本的OD值超出標(biāo)準(zhǔn)曲線的上限，請在實驗前適當(dāng)稀釋樣本以獲得精確結(jié)果。在分析數(shù)據(jù)時，樣本實際濃度應(yīng)為標(biāo)準(zhǔn)曲線上獲得的濃度乘以稀釋倍數(shù)。