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鱟試驗法中有關內毒素與熱原及內毒素抑制因子的問題

瀏覽次數:1035 發布日期:2022-8-30  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
一、內毒素與熱原的關系問題
目前很多文獻中,熱原與內毒素為同義詞,經常互用。但并不是所有的內毒素均有很強的致熱性,因為已經證明某些天然的內毒素致熱性較弱、需要較大的劑量(如>2μg/kg)時才能引起發熱。反之,亦并不是所有的能引起發熱的物質均為內毒素。許多化學物質,特別是中樞作用藥如利血平、丙咪嗪、5-羥色胺、胍乙啶在一定條件下亦能致熱。各種微生物及其產物、免疫復合物及激素等均可引起發熱。而這些發熱物質易被熱力破壞,故大輸液和藥品、器械在工業生產過程中容易防止污染而被清除,僅有內毒素難以清除,易造成危害。
 

二、內毒素抑制因子問題
內毒素抑制因子又稱內毒素抑制物質、主要存在于血漿中。血漿中內毒素抑制因子很多,因此內毒素抑制因子并非僅為一種單一的成分,而是由好幾種(甚至數十種〉物質組成。內毒素抑制因子與內毒素的作用為一種可逆的反應,并不破壞內毒素,當采取各種方法除去或破壞這些抑制因子后,內毒素的活性可以完全恢復。


目前對內毒素抑制因子的本質尚未完全搞清,一般認為可能有以下幾類:

1.蛋白酶類
有人發現血清中的兩種α2球蛋白對內毒素有抑制作用。在Ca++存在下,一種耐熱的血清酯酶有抗內毒素的作用,另一種不耐熱的α-球蛋白可使LPS碎片去毒性。日本學者小林正義從血清中分離到稱為E1和E3的內毒素抑制因子,根據其分子量、碳水化-物含量、氨基酸成分,以及應用免疫擴散及免疫電泳技術證明E1即α1 -抗胰蛋白酶(α1 -AT),E3即抗凝血酶Ⅲ(A t-Ⅲ )。繼而,用純化的α1 -AT及At-Ⅲ亦證實其有抑制LT反應的作用。其中的α1 -AT的抑制作用強,At一Ⅲ的抑制作用較弱。但后者在肝素存在時,抑制作用可增強。

2.菌體抗體
亦稱O抗體,為內毒素O抗原刺激機體而產生的。動物實驗證明,抗體對LT(鱟試驗法,Limulus test)反應有抑制作用,抑制機理可能為與內毒素的O抗原結合。O抗體的抑制作用是有型特異性的,與補體無關。其它如膽汁酸鹽、藥物(EDTA,肝素、青霉素和多粘菌素B等)對LT反應亦有抑制作用。

常用除去血漿抑制因子方法的除去能力如表3所示。

從表3的結果可以看出,上述幾種方法均不能完全去除血漿中的抑制因子。今后宜加強這方面的研究。

發布者:科德角國際生物醫學科技(北京)有限公司
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