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血液腫瘤常用體內外模型總結&工具病毒使用指南

瀏覽次數:2341 發布日期:2016-12-29  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負

血液腫瘤主要包括各類白血病、多發性骨髓瘤以及惡性淋巴瘤。急性白血病占常見惡性腫瘤的第八位,淋巴瘤也是在前十位,并且發病率逐年升高,多發性骨髓瘤的整個發病率在血液惡性腫瘤里面占10%。

血液腫瘤發病急,在傳統的放療、化療、骨髓移植等治療方式下,治療周期長、費用高昂、過程痛苦,但治愈率卻并不很理想。兒童白血病是兒童發病率最高的一種惡性腫瘤,近幾年臨床病例數量更是在逐年上升,已成為兒童腫瘤中的頭號殺手。因此,血液腫瘤的治療研究是當務之急。針對血液腫瘤的研究少不了細胞和動物模型的加持。怎么選擇這些工具能夠幫助我們更好的進行研究,獲得陽性數據,發表論文,申請基金,登上人生巔峰,你有了解嗎?

一、我需要哪種細胞模型?是否易于操作?

研究過程中,為了驗證基因的功能,我們常常需要做基因操作(過表達,干擾或者敲除)。但由于血液腫瘤細胞懸浮生長的特性,大大增加了基因操作的難度。慢病毒是一種非常高效的基因操作工具,在大部分懸浮細胞系中也具有不錯的表現。下面幫大家總結了一些常用血液腫瘤細胞的特性,以及慢病毒的應用情況:

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懸 浮 細 胞 感 染 小 貼 士↓↓↓

如果細胞MOI>>100,怎么辦?吉凱對于難感染的懸浮細胞,也有辦法:

1. 初級版:采用離心感染方法,增加病毒感染時與細胞的接觸,從而提高感染效率。如將細胞培養板密封后,用平角轉子離心機1000g離心15min-1h,再放回培養箱中正常培養;

2. 進階版:使用GMP級慢病毒。尤其對于一些原代分離的細胞,可通過使用高純度的病毒減小病毒感染對細胞的影響,從而提高感染效率。吉凱擁有國內唯一基因工程載體GMP生產車間,特殊純化工藝保證臨床級慢病毒的純度和滴度;

3. 終極版:如果是做CAR-T的老師,還可配合使用吉凱自有專利的CAR-T細胞感染試劑盒,可保證T細胞病毒感染效率在40%-80%。

二、細胞實驗效果不錯,那動物實驗怎么做?

穩定性、重復性較好的動物模型可在腫瘤基礎性研究和抗腫瘤藥物篩選中發揮重要作用。血液腫瘤常用的動物模型主要有:I皮下移植瘤模型;II血液模型。皮下移植瘤模型較容易建立,易于動態觀察腫瘤的生長狀態。血液模型則一般以生存天數作為觀察終點,用活體成像、病理切片、流式細胞術等方法檢測小鼠骨髓及臟器中的腫瘤細胞生長及浸潤情況。該模型與白血病患者的病理生理狀況較為接近,但實驗難度較大。

 

體內外模型選好了,那么我的實驗需要使用哪種慢病毒載體對基因進行操作呢?

啟動子、熒光標記、抗性標簽是我們選擇載體需要考慮的三大要素。實驗不同,這些元件也需要相應變化。按例祭出神圖一張,定制你的專屬載體,就是這么簡單!

上海吉凱基因化學技術有限公司成立于2002年,擁有BSL-2級別的慢病毒包裝實驗室。病毒生產線通過ISO9001質量管理體系驗證,月均定制基因病毒產品包裝超過1000次。慢病毒生產采用6項QC檢測、病毒純度分級純化以及病毒滴度絕對定量檢測確保病毒質量。

400名兢兢業業的吉凱人,用專業換您的高效。

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參考文獻

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之前幾期給大家分享了幾種大癌種的體內外模型和工具總結,想再看看的,請戳下面:

1. 肺癌研究體內外模型綜述

2. 結直腸癌研究體內外模型綜述

3. 胃癌研究體內外模型綜述

4. 肝癌體內外模型綜述

5. 胰腺癌研究體內外模型綜述


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