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siRNA/shRNA載體構建
siRNA/shRNA載體構建
服務類別:分子與細胞總訪問:1697
最后更新:2012-2-28半年訪問:54
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服務商: 百奧邁科生物技術有限公司 查看該公司所有服務 >>
  • 服務介紹
  • 公司簡介

目前用于實驗研究及藥物靶點篩選的siRNA合成方法主要有兩種:載體介導表達siRNA和化學合成siRNA;瘜W合成siRNA具有沉默效率較高的優點,但在體內的作用時間較短,且一次性消耗,無法獲得克;構建siRNA質粒可以在E.coli內復制擴增,真核細胞內作用時間較長,且質粒可長期保存,同時可測序保證其100%序列同源性。

  

技術特點:
1)多種siRNA 表達載體,可以在細胞內直接轉錄出siRNA,行使其RNAi 功能,包  括以下常用載體:
 
載體名稱 啟動子 篩選基因 標記基因
pRNAi-U6.1/Neo  U6  Neomycin  GFP 
pRNAi-CMV3.2/Neo  CMV  Neomycin  GFP 
pRNAi-CMV4.1/Neo
(pSilencer4.1) 
CMV  Neomycin     
2)載體帶有GFP 標簽可以監測轉染效率。構建好的siRNA 表達載體可直接用于轉染細胞進行RNAi 實驗;
3)本公司還可根據客戶需要提供各種商業化表達載體;
4)本公司可以為客戶構建線性siRNA 表達載體,shRNA 表達載體,miRNA 表達載體以及病毒型RNAi 載體。
 
構建流程:
1)siRNA 靶點設計;
  • 客戶提供靶基因的siRNA 序列,由本公司將其克隆到siRNA 表達載體上。
  • 客戶提供靶基因的相關信息(基因的mRNA 序列或Genbank Accession No.),  根據客戶要求,本公司設計高效特異性的3-4 條針對靶基因的siRNA,并可免費提供陰性和陽性對照質粒,便于客戶使用。

2)合成設計好的DNA 并退火形成雙鏈DNA,克隆到客戶要求的載體上。
3)通過測序進行驗證。
4)構建成功的siRNA 質粒連同測序報告、產品說明書一起寄送到客戶手中。
質量保證:
符合設計要求的siRNA 序列測序結果和實驗報告。

 siRNA/shRNA載體構建 報價表: 

服務內容 報價
單獨構建一條 siRNA/shRNA載體  1000元
構建3-4條siRNA/shRNA 載體 800元/條

注:可根據客戶要求提供siRNA 的陽性及陰性對照質粒。
 

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