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基因過表達(dá)慢病毒包裝服務(wù)
基于國際學(xué)術(shù)界公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)流程,維洛信采用第三代包裝系統(tǒng)系統(tǒng)在293T細(xì)胞中進(jìn)行慢病毒的生產(chǎn)與包裝,并建立了完善的純化和質(zhì)控方法,生產(chǎn)的慢病毒顆粒可直接應(yīng)用于各類體內(nèi)體外試驗(yàn)。
服務(wù)類別:其他生物研發(fā)總訪問:359
最后更新:2019-12-18半年訪問:25
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  • 服務(wù)介紹
  • 公司簡介
基于國際學(xué)術(shù)界公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)流程,維洛信現(xiàn)提供介導(dǎo)基因過表達(dá)的慢病毒制備服務(wù)。我們采用第三代包裝系統(tǒng)系統(tǒng)在293T細(xì)胞中進(jìn)行慢病毒的生產(chǎn)與包裝,并建立了完善的純化和質(zhì)控方法,生產(chǎn)的慢病毒顆粒可直接應(yīng)用于各類體內(nèi)體外試驗(yàn)。
 

慢病毒優(yōu)勢:

1. 廣泛宿主細(xì)胞:與逆轉(zhuǎn)錄載體不同,能夠感染分裂期與靜止期細(xì)胞;包膜質(zhì)粒使用皰疹病毒VSVG蛋白,宿主范圍更廣,包括神經(jīng)元細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、心肌細(xì)胞、干細(xì)胞等多種類型的細(xì)胞。
2. 極強(qiáng)感染能力:慢病毒載體具有極高的感染效率,尤其適用于難轉(zhuǎn)染的神經(jīng)元細(xì)胞、干細(xì)胞、原代細(xì)胞和其他不分化細(xì)胞。
3. 長期穩(wěn)定表達(dá):外源基因整合入基因組,實(shí)現(xiàn)持久性表達(dá),可應(yīng)用于構(gòu)建穩(wěn)定細(xì)胞系、制備轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等。
4. 低免疫原性:體內(nèi)實(shí)驗(yàn)不易造成非特異性反應(yīng)與免疫抑制。
5. 高安全系數(shù):尚未發(fā)現(xiàn)對人的致病性,已被應(yīng)用于臨床治療;采用三質(zhì)粒包裝系統(tǒng),去除致病基因和輔助序列,包裝質(zhì)粒和載體質(zhì)粒盡量降低同源性,進(jìn)一步提高了生物安全性。
 

服務(wù)流程:

1. 方案溝通
2. 基因克隆:將目的基因(Gene of Interest)構(gòu)建入我們的專有慢病毒轉(zhuǎn)移質(zhì)粒,測序驗(yàn)證
3. 病毒包裝:三代慢病毒包裝系統(tǒng)(轉(zhuǎn)移質(zhì)粒pLV-MNG + 包裝質(zhì)粒 + 包膜質(zhì)粒)共轉(zhuǎn)染入293T細(xì)胞
4. 收毒:48 h、72 h孵育后收獲培養(yǎng)上清
5. 純化濃縮:超速離心+超濾, 去除雜質(zhì)蛋白和DNA;根據(jù)不同要求,我們還可應(yīng)用切向流過濾、離子交換層析、蔗糖梯度離心等方式進(jìn)一步純化與濃縮
6. 質(zhì)量控制:
- 多重酶切質(zhì)粒鑒定
- p24 ELISA核心蛋白定量
- 細(xì)胞轉(zhuǎn)導(dǎo)檢測(帶有熒光標(biāo)簽)
- qPCR檢測病毒滴度
 

包裝服務(wù)流程圖

 

交付內(nèi)容:

定制慢病毒顆粒
對照病毒(可用于轉(zhuǎn)導(dǎo)測試)
詳細(xì)實(shí)驗(yàn)報(bào)告
 

維洛信慢病毒平臺:

1. 三代慢病毒包裝系統(tǒng)與嚴(yán)格制備工藝,力求獲取最優(yōu)滴度、活性、純度與一致性的慢病毒產(chǎn)品
2. 多種優(yōu)化啟動(dòng)子(CMV, mCMV, CAG, PGK, Ubc等)與報(bào)告基因(EGFP、mCherry、EYFP等)或藥篩基因(Neo, Puro, Hygromycin等)可供選擇,滿足您的不同需求
3. 滴度高:維洛信可提供108~109 TU/ml及以上滴度的病毒,滿足大部分實(shí)驗(yàn)的使用要求
4. 靈活生產(chǎn):我們提供體外應(yīng)用級別與體內(nèi)應(yīng)用級別各種規(guī)格的病毒(小規(guī)格、中規(guī)格、大規(guī)格)的制備服務(wù)
5. 具有競爭力的價(jià)格與貨期
 

針對不同應(yīng)用方向,我們提供以下慢病毒制備服務(wù):

bio-equip.com
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